Что такое ячейка в банке: Как с помощью банковской ячейки купить квартиру и сохранить ценные вещи — Российская газета

Что такое ячейка в банке: Как с помощью банковской ячейки купить квартиру и сохранить ценные вещи — Российская газета

Содержание

Банковские ячейки и сейфы, открыть депозитную ячейку в банке ОТП

Вы собираетесь в отпуск и беспокоитесь за сохранность документов или денег, остающихся дома? Вы планируете купить квартиру и Вам нужно безопасное место для крупной суммы наличных для сделки?

ОТП Банк предлагает Вам воспользоваться надежной и современной услугой – арендой индивидуальных банковских сейфов.

Оцените преимущества аренды сейфовых ячеек в ОТП Банке:

  • Удобные сроки аренды ячеек – от 1-го дня
  • Выгодные гибкие тарифы
  • Большой выбор размеров сейфовых ячеек
  • Широкая сеть отделений банка

Вам важно быть уверенными в сохранности самого ценного? Вы хотите сохранить конфиденциальность своих документов? Или Вы приготовили для крупной покупки большую сумму денег наличными?

Приходите в ОТП Банк и арендуйте

индивидуальный банковский сейф под свои нужды! Мы предлагаем качественный сервис, разветвленная сеть отделений с сейфовыми ячейками и удобное время их работы. Различные типоразмеры сейфовых ячеек, низкие тарифы за аренду и выверенная процедура работы наших специалистов с банковскими сейфовыми ячейками обеспечат Ваше спокойствие и конфиденциальность информации о хранящихся в нашем банке ценностях

Узнайте размеры сейфовых ячеек в ближайшем к Вам отделении ОТП Банка:

Москва и Московская область
Регионы России
Филиал «Омский»

Полезная информация

Что можно хранить в сейфовых ячейках?
В индивидуальных банковских сейфах Вы можете хранить любые вещи, разрешенные к хранению российским законодательством. В список того, что не разрешается хранить в сейфовых ячейках, соответственно, попадают наркотики, оружие и т.д. Правила конфиденциальности ОТП Банка не подразумевают проверку того, что Вы закладываете в ячейку. Однако Вам необходимо будет подписать соглашение с банком, в котором Вы гарантируете, что не будете хранить в банковском сейфе ничего противозаконного.

Может ли другой человек иметь доступ к арендованной мною банковской сейфовой ячейке?
Да, такое возможно только в случае, если Вы лично оформили  и предоставили в банк доверенность на доступ к Вашему арендованному индивидуальному банковскому сейфу на другого человека.

Может ли сотрудник банка в мое отсутствие получить доступ к моей сейфовой ячейке?
Нет, такая ситуация исключена. Для того чтобы открыть индивидуальный банковский сейф необходимо наличие всех ключей. Один из необходимых ключей хранится у клиента, то есть у Вас.

Возможно ли нашей компании воспользоваться услугой аренды банковских сейфов в ОТП Банке?
Да, конечно. Вашей компании достаточно будет заключить договор от юридического лица на аренду индивидуальных банковских сейфов.

Аренда индивидуального банковского сейфа (ИБС)

Сейфовую ячейку можно открыть только с помощью двух различных ключей: один хранится в банке, второй — у вас или вашего доверенного лица. Это означает, что сейф можно открыть исключительно в вашем присутствии или присутствии доверенного лица.

Доступ к сейфовой ячейке предоставляется в дни и часы обслуживания клиентов в банке при предъявлении клиентом ключа и документа, удостоверяющего личность.

Доступ доверенных лиц возможен при наличии ключа, документа, удостоверяющего личность, и доверенности, заверенной нотариусом или оформленной и удостоверенной в банке, а также дополнительного документа, в котором указаны данные представителя клиента (например, общегражданский заграничный паспорт или водительское удостоверение).

Если сейф используется двумя клиентами, банк осуществляет контроль за соблюдением условий доступа, отражённых в договоре.

Запрещено хранить легковоспламеняющиеся, токсичные, радиоактивные, взрывчатые, наркотические вещества, иные предметы (вещества), объекты флоры и фауны, являющиеся источниками неблагоприятного воздействия на человека, окружающую среду, сейфовую ячейку или оборудование банка, а также предметы, свойства которых исключают возможность их хранения.

Получив в пользование сейфовую ячейку, вы можете выдать доверенность на пользование ячейкой третьему лицу.

Клиент — физическое лицо может наделить полномочиями своего представителя на основании нотариально удостоверенной доверенности или доверенности, оформленной и удостоверенной банком.

Клиент — юридическое лицо может наделить полномочиями своего представителя как по нотариально удостоверенной доверенности, так и по доверенности, удостоверенной руководителем (органом управления) юридического лица.

Вы можете использовать сейфовую ячейку для проведения расчётов по сделкам на крупные суммы, например, при покупке или продаже недвижимости и при любых других крупных сделках. Расчёты через банковскую ячейку оградят вас от возможного мошенничества при сделках и обеспечат своевременную оплату по сделке.

Для таких сделок мы предлагаем вам заключить договор предоставления в пользование ячейки с участием двух клиентов. В банке существует два вида договоров предоставления в пользование сейфа с двумя клиентами:

1. Договор предоставления в пользование ИБС с особыми условиями доступа (совместный доступ) — доступ к сейфовой ячейке осуществляется двумя клиентами совместно в течение всего срока договора.v

2. Договор, по которому срок пользования ИБС разделён на три периода — сначала право доступа к индивидуальному банковскому сейфу даётся двум клиентам совместно, а затем каждому из них по отдельности.

Аренда ячейки в банке | АТБ

В перечень банковских услуг АТБ входит аренда индивидуальной сейфовой ячейки. Это надежный способ хранения ценных вещей и сбережений. Домашний сейф не всегда является гарантией безопасности, и в ряде случаев действительно стоит отдать предпочтение сейфовой ячейке. В нашем банке услуга предоставляется по выгодной цене.

Условия

Арендовать бокс можно на постоянной основе или временно, например на период Вашего отсутствия в городе. Договор предполагает возможность контролировать круг лиц, которые имеют доступ к имуществу, помещенному на хранение.

При работе с ячейкой мы гарантируем полную конфиденциальность и защищенность информации о ее содержимом. Во время Вашего присутствия в хранилище посторонние лица сюда не допускаются. В случае необходимости к ячейке Вас сопроводит представитель службы безопасности. Бокс можно арендовать в любом отделении АТБ.

Тарифы

Цена услуги является конкурентной и полностью оправдывает то спокойствие и безопасность, которые будут обеспечены Вашим ценностям. Стоимость аренды ячейки зависит от размеров бокса и срока, на который заключается договор.

Сколько будет стоить аренда ячейки в банке в конкретном случае, можно уточнить у наших менеджеров по телефону.

Что можно хранить?

В банке имеется ряд правил и ограничений при аренде ячеек в банке. На хранение принимаются драгоценности, деньги, документы, антиквариат и многое другое.

В индивидуальную сейфовую ячейку не принимаются на хранение:

  • вещи, запрещенные законом, такие как оружие или наркотики;
  • предметы, непригодные к хранению;
  • вещества и объекты, которые представляют потенциальную опасность (легковоспламеняющиеся, взрывоопасные и радиоактивные предметы).

За подробной информацией об условиях оформления договора, процессе описи ценностей на хранение и стоимости аренды ячейки обращайтесь к сотрудникам банка.

Как использовать банковскую ячейку.

Аренда сейфовых ячеек | Банк ЗЕНИТ

Аренда сейфовых ячеек | Банк ЗЕНИТ

Об услуге

  • Полная конфиденциальность вложений в ячейку – информацией о содержимом сейфовой ячейки располагает только клиент*.
  • Доступ к ячейке возможен только при одновременном присутствии клиента и работника Банка.
  • Банк предоставляет технические средства контроля для пересчета и проверки (установления подлинности) денежных средств.
  • Проверка и пересчет денежных средств могут быть произведены кассовым работником Банка по запросу клиента в его присутствии.
  • Возможность предоставления права пользования ячейкой доверенному лицу.
  • Возможность предоставления доступа к ячейке третьим лицам совместно с клиентом или его доверенным лицом.
  • Договор заключается на срок от 7 до 365 дней.
  • Возможность выбора размера ячейки.
  • Ключ от сейфовой ячейки хранится у клиента.
Где оформить

Сейфовые ячейки расположены в специально оборудованных хранилищах Банка
Список адресов

Вы находитесь:

Аренда сейфовой ячейки в Банке ЗЕНИТ

Аренда банковского сейфа целесообразна, когда необходимы повышенные гарантии сохранности документов, ценных бумаг, редких и дорогостоящих вещей. Также данная услуга банка позволяет проводить сложные сделки, например, связанные с приобретением и оформлением недвижимости, когда необходим совместный доступ к вложению, но с соблюдением определенных условий. Воспользоваться ячейкой могут частные клиенты, индивидуальные предприниматели и юридические лица, в том числе иностранные граждане и нерезиденты РФ.

В Банке ЗЕНИТ вы можете арендовать сейфовую ячейку:

  • для хранения ценных предметов и документов;
  • для проведения сделки купли-продажи;
  • для проведения ипотечной кредитной сделки.

При аренде банк предоставляет дополнительные средства защиты: пенал с кодовым замком, индикаторную наклейку, пластиковую упаковку. Они обеспечивают сохранность вложения и не позволяют тайно получить доступ к ценностям, поскольку вскрыть ячейку без видимых следов невозможно. Также вы можете поручить банку пересчет денег и их проверку на подлинность перед тем, как поместить на хранение. При желании можно сделать вложение в ячейку конфиденциально.

Обратите внимание, что аренда банковского сейфа возможна не во всех офисах банка. Список отделений, оборудованных хранилищем, а также перечень документов, необходимых для заключения договора аренды, вы можете посмотреть на сайте или уточнить в контакт-центре. Также в разделе «Тарифы и документы» можно ознакомиться с ценами на аренду сейфовой ячейки в зависимости от ее размера и сроков хранения вложения.

Наверх

Сообщение отправлено

По срочным вопросам можно позвонить

Присоединяйтесь к нам, читайте полезные материалы и задавайте вопросы 💡

+74959370737, +74957775707, +74959370735, +74957775705, +74959671111, +74959330732, +74959370996, +74959330736, +74959370992, +74952283211

Банковские сейфы, аренда сейфовых ячеек

Если у вас возникла необходимость в безопасном хранении документов, денег, драгоценностей или других ценных и важных для вас предметов или вы нуждаетесь в передаче большой суммы денег в процессе заключения сделки с недвижимостью, воспользуйтесь для этих целей услугой АКБ «ФОРА-БАНК» (АО) по аренде банковских сейфов (сейфовых ячеек). Сейфовые хранилища Банка оборудованы по последнему слову охранной техники и соответствуют всем современным мировым требованиям к хранилищам такого рода. Во многих депозитариях банка доступна услуга регистрирующей компании.

Внимание!

Уважаемые клиенты, в соответствии с условиями предоставления услуги «СМС-информирование» по заключенным договорам аренды индивидуальных банковских сейфов АКБ «ФОРА-БАНК» (АО) информируем вас о ее прекращении с 29 апреля 2020 года. В связи с изменениями, просим обратить внимание на сроки окончания заключенных вами договоров аренды индивидуальных банковских сейфов.

О дате возобновления услуги и  условиях ее предоставления будет сообщено в ближайшее время, следите за новостями!

Новая услуга «Сейф + аккредитив»
Новая услуга «Эксперт сейфинг» (подробно)

Телефон горячей линии по вопросам организации записи на сделки, а также для уточнения информации по процедурам работы с банковскими сейфами в АКБ «ФОРА-БАНК» (АО): 8 (800) 100 9889 (звонок по России бесплатный).

Список офисов с доступной услугой по аренде банковских сейфов:  


Москва и МО:

ДО «Аминьевское шоссе»
Аминьевское шоссе, дом 6  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Аминьевское шоссе»

ДО «Гагаринский»
ул. Вавилова, д. 6  |  8 (800) 100 9889  
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Гагаринский»

ДО «Дирижабль»
Профсоюзная ул., д. 64, к. 2  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Дирижабль»

ДО «Дмитровский»
Дмитровское ш., вл. 163А, (ТРЦ «РИО», секция А92)  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Дмитровский»

ДО «Жулебино» 
ул. Генерала Кузнецова, д. 27, к. 1  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Жулебино»

ДО «Зубовский бульвар»
Зубовский б-р, д. 25  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Зубовский бульвар»

ДО «Измайловский»
ул. 9-я Парковая, д. 39  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Измайловский»

ДО «Китай-город»
Подколокольный пер., д. 13, стр.1  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа ДО «Китай-город»

ДО «Красная Пресня»
ул. Красная Пресня, д. 22  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Красная Пресня»

ДО «Кутузовский»
Кутузовский проспект, дом 17 | 8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Кутузовский»

ДО «Ленинградский»
Ленинградское ш., д. 25  |  8 (800) 100 9889 
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Ленинградский»

ДО «Ленинский»
Ленинский проспект, дом 109, ТРЦ «РИО»  |  8 (800) 100 9889
[email protected] ru
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Ленинский»

ДО «Медведково 1»
Проезд Дежнёва, дом 27, корпус 1  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Медведково 1»

ДО «Митино»
Пятницкое ш., д. 9  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Митино»

ДО «Орехово-Зуево»
Центральный бульвар, дом 5  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Орехово-Зуево»

ДО «Проспект Вернадского»
Проспект Вернадского, д. 86А  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа ДО «Проспет Вернадского»

ДО «Пушкинский»
ул. Тверская, д. 18, к. 1  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Пушкинский»

ДО «Реутов»
МО, г. Реутов ул. Южная, д. 10  |  8 (800) 100 9889
[email protected] ru
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Реутов»

ДО «РИО-Реутов»
МО, г. Реутов 2-й км МКАД, д. 2  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Рио-Реутов»

ДО «СИТИ»
Пресненская наб., д. 2  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «СИТИ»

ДО «Цветной бульвар»
Цветной бульвар, дом 2  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа ДО «Цветной бульвар»

ДО «Черёмушки»
ул. Б. Черёмушкинская, д. 1  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Черёмушки»

ДО «Шаболовский 1»
ул. Шухова, д. 21  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Шаболовский 1»

ДО «Юго-Западный»
ул. Наметкина, д. 12А  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Заявка на аренду банковского сейфа в ДО «Юго-западный»

Филиал АКБ «ФОРА-БАНК» (АО) в г. Калуга:
— ул. Воронина, д. 4, Центральный офис  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
— ул. Кирова, д. 1 (2 этаж), ДО №3  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
— ул. Кирова, д. 63, ДО №6  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
Посмотреть на карте

Офисы в городах:

г. Обнинск,
пр-т Маркса, д. 73а, ДО №7 «Обнинский»  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
(посмотреть на карте)

г. Балабаново,
ул. 1 Мая, д. 2, ДО №13 «Балабановский»  |  8 (800) 100 9889
[email protected]
(посмотреть на карте)

г. Тула, ул. Советская, д. 29, ОО «Тульский-4»  |  8 (800) 100 9889 
[email protected]
(посмотреть на карте)

МО, г. Наро-Фоминск,
ул. Маршала Жукова, д. 8, ОО «Наро-Фоминский»  |  8 (800) 100 9889  
[email protected]
(посмотреть на карте)

МО, г. Одинцово,
Можайское ш., д. 80А, пом-е IX, ОО «Одинцовский»  |  8 (800) 100 9889  
[email protected] ru
(посмотреть на карте)

МО, г. Балашиха,
улица проспект Ленина, дом 8, ОО «Балашиха»  |  8 (800) 100 9889  
[email protected]
(посмотреть на карте)

МО, г. Подольск, 
проспект Ленина, дом 111, помещение 2, ОО «Подольский»  |  8 (800) 100 9889  
[email protected]
(посмотреть на карте)

МО, г. Химки,
Юбилейный проспект, д. 7, пом.004, ОО «Химки»  |  8 (800) 100 9889  
[email protected]
(посмотреть на карте)

МО, г. Люберцы,
Октябрьский проспект, дом 149, пом. 1, ОО «Люберцы»  |  8 (800) 100 9889  
[email protected]
(посмотреть на карте)

Филиал АКБ «ФОРА-БАНК» (АО) в г. Ярославль:
— Которосльная набережная, д. 55  |  8 (800) 100 9889  (посмотреть на карте)

Офисы в городах:
г. Рыбинск,
ул. Герцена, д. 62 / ул. Кирова, д. 9  |  8 (800) 100 9889, ДО «Рыбинский» (посмотреть на карте)

Филиал АКБ «ФОРА-БАНК» (АО) в г. Ростов-на-Дону:
ул. Пушкинская, д. 117   |  8 (800) 100 98 89 (посмотреть на карте)

Офисы в городах:
г. Сочи,
улица Несебрская, дом 1А, ТЦ Grand Marina  |  8 (800) 100 9889, ОО «Сочи» (посмотреть на карте)

Тарифы на аренду индивидуальных банковских сейфов и сопутствующие услуги

Индивидуальный банковский сейф — «Альфа-Банк»

Надежное место

Согласитесь, хранить ценности в матраце, под подушкой или даже в тайнике, спрятанном в гостиной за пейзажем, — это несколько старомодно. Альфа-Банк предлагает вам удобное, надежное и безопасное место для хранения ценностей — индивидуальный банковский сейф.

В индивидуальном сейфе можно хранить деньги, ювелирные изделия, документы, ценные бумаги, произведения искусства — словом, все, чем вы дорожите, и что вам, возможно, хотелось бы скрыть от посторонних глаз.

Любой срок хранения

Арендовать индивидуальный сейф можно на любой срок — от одной недели до нескольких лет. Небольшие сроки аренды особенно удобны в тех случаях, когда вы собираетесь в отпуск или командировку.

Мой сейф — моя крепость

Индивидуальные сейфы находятся в специально оборудованном помещении Альфа-Банка  — депозитарии. Помещение депозитария оснащено самыми современными средствами защиты и круглосуточно охраняется. Сейфы представляют собой ячейки различных размеров в бронированном шкафу. Размер ячейки вы выбираете сами, в зависимости от ваших потребностей. Сейф закрывается двумя замками — электронным и механическим. Можете быть спокойны: доступ к ценностям третьих лиц (включая сотрудников банка) исключен. Ключами от сейфа обладаете только вы.

Услуга предоставляется в отделениях Альфа-Банка с идентификатором «Аренда индивидуальных банковских сейфов».

Конфиденциальность

Объяснив вам, как пользоваться сейфом, сотрудник банка выходит из депозитария. Никто кроме вас не присутствует там в момент вложения ценностей в ячейку — таким образом соблюдается полная конфиденциальность.

Альфа-Банк высоко ценит ваше доверие. Если вы поместили ценные вещи в индивидуальный сейф, мы гарантируем их полную сохранность и абсолютную неприкосновенность.


PDFТарифы на операции по предоставлению в пользование индивидуальных банковских сейфов389,4 КБ

Сейфовые ячейки — Банк Акцепт

Банк Акцепт предоставляет в аренду индивидуальные сейфовые ячейки для хранения денежных и материальных ценностей. Договор заключается на срок не менее 15 дней и может быть оформлен по трем схемам:

  • особые условия;
  • для одного партнера;
  • для двоих партнеров.

При заключении договора на двух арендаторов банк обеспечивает доступ к сейфовой ячейке только в присутствии двоих партнеров одновременно.

При заключении договора на особых условиях подробно расписывается схема режима доступа к банковской сейфовой ячейке на различных этапах сделки (такой договор, как правило, используется при совершении крупных сделок, в которых принимают участие несколько сторон).

Со своей стороны банк гарантирует доступ к сейфовой ячейке и возможность помещения/изъятия и хранения ценностей без чьего-либо вмешательства и контроля.

К пользованию сейфовыми ячейками допускаются третьи лица на основании доверенности. Для оформления доступа необходимы паспортные данные доверенного лица.

Стоимость услуг аренды сейфовых ячеек определяется согласно действующим банковским тарифам в соответствии с оговоренным с клиентом сроком аренды.

Список документов Клиента для заключения договора пользования Сейфом
  1. Для физических лиц:
  • Для юридических лиц :
    • Для юридических лиц, не имеющих расчетный счет в Банке:►▼

      • Документ, удостоверяющий личность лица, заключающего Договор
      • Протокол общего собрания / Решение единственного участника/Приказ о назначении руководителя
      • Устав,
      • Выписка из ЕГРЮЛ с датой выдачи не ранее, чем за 30 дней до заключения Договора,
      • В случае заключения Договора лицом, действующим на основании Доверенности:
      • Копия карточки с образцами подписей Клиента, заверенная обслуживающим Клиента банком или нотариально
      • Доверенность, выданная уполномоченному лицу.

    «Акцепт» гарантирует клиентам безопасность и конфиденциальность содержимого сейфовых ячеек, расположенных в специально оборудованной зоне Банка с ограниченным доступом.

    Тарифы на предоставление индивидуальных банковских сейф-ячеек на 01.03.2020

    Главный и рабочий сотовые банки


    Когда клеточная линия должна использоваться в течение многих производственных циклов, рекомендуется двухуровневая банковская система клеток, состоящая из основного банка клеток (MCB) и рабочего банка клеток (WCB). Если заказчик не предоставил, линия клеток создается из одного клона, и эта линия клеток используется для создания MCB. Этот MCB должен быть охарактеризован и всесторонне протестирован на наличие загрязняющих веществ, таких как бактерии, грибки и микоплазмы. Большинство клеточных линий также требуют проверки на стерильность и ПЦР на вирусы.

    Клетки из MCB расширяются, чтобы сформировать WCB, который характеризуется жизнеспособностью клеток перед использованием в производственном процессе. Банки производственных клеток рекомендуется хранить в двух или более удаленных друг от друга областях в пределах производственного объекта, а также на удаленном участке, чтобы избежать потери клеточной линии. Двухсайтовое хранение всех ячеек осуществляется как на месте, так и за его пределами. Как только ваш проект будет завершен, любые неиспользуемые ячейки могут быть возвращены вам или уничтожены по вашему выбору.

    Для основных банков клеток MDS определяет целостность плазмиды экспрессии генов для основной массы клеток и для статистически значимого числа клонов. Этот метод анализа продиктован способностью определенных клеток разрастаться по большей части культуры во время процесса амплификации, который происходит, когда основной банк клеток расширяется до рабочего банка клеток и процессов в масштабе производства.

    Процесс анализа начинается с выделения достаточного количества клонов для адекватного отбора проб популяции клеток в культуре.Характеристика изолятов отдельных клонов гарантирует, что в банке клеток нет значительного количества клеток с отсутствующими или мутировавшими генетическими элементами. Для основного банка клеток, рабочего банка клеток и конечных продуцирующих клеток рестрикционное картирование, Саузерн-блот-анализ и секвенирование выполняются на ДНК, полученной из основной массы клеток.

    MDS обеспечивает проверку последовательности путем прямого анализа фрагментов ОТ-ПЦР, нацеленных на соответствующую мРНК для основного банка клеток, а также рабочего банка клеток и конечных продуцирующих клеток.Саузерн-блот-анализ также выполняется для подтверждения стабильности кассет экспрессии со встроенными хромосомами.

    Продукты для генной терапии: MDS обеспечивает анализ нуклеиновых кислот вирусных и невирусных генных терапевтических конструкций, включая Саузерн-блот-анализ / рестрикционное картирование; 100% точная проверка последовательности ДНК или РНК из вирусных или плазмидных конструкций; и количественная ПЦР ДНК или РНК.

    Анализ растений: MDS предоставляет услуги по идентификации и характеристике генетически модифицированных культур и растений, включая Саузерн-блот-анализ; ПЦР-анализ и проверка последовательности экспрессионной кассеты.

    Good Cell Banking Practices

    Ампулы этого основного банка клеток (2-3) должны быть выделены для подтверждения контроля качества, что количество клеток и жизнеспособность банка являются приемлемыми и что банк свободен от бактерий, грибов и микоплазм. На этом этапе также важно аутентифицировать основной банк клеток с помощью STR-профилирования, штрих-кодирования ДНК или анализа SNP. Также необходимы дополнительные тесты, такие как вирусный скрининг. После успешного завершения этих тестов ампулу из основного банка клеток следует разморозить и культивировать для получения рабочего банка клеток.Размер этого банка снова будет зависеть от предполагаемого уровня спроса. Перед использованием культур для рутинных экспериментов или производства снова требуются тесты контроля качества (подсчет клеток, жизнеспособность, аутентификация и отсутствие микробных примесей).

    Важное примечание: Аутентификация основного и рабочего банков клеток с помощью STR-профилирования, штрих-кодирования ДНК или анализа SNP.

    Внедрение данной банковской системы обеспечивает:

    • Материал стабильного качества
    • Эксперименты проводятся с культурами из того же диапазона числа пассажей
    • Клетки культивируются только при необходимости
    • Сохраняются исходные характеристики клеточной линии

    Банкноты

    1. Количество ампул, приготовленных для основного и рабочего банков клеток, зависит от прогнозируемого спроса на их использование.
    2. Количество ампул, отобранных для контроля качества, зависит от размера банка. В идеале перед использованием следует протестировать 5% банка.
    3. Ампулы из рабочего банка клеток следует использовать последовательно, выдерживая клетки в культуре не более чем на заранее определенное количество удвоений клеток. Это число будет наименьшим в случае клеточных линий с конечной продолжительностью жизни (например, диплоидных линий).
    4. Рабочий банк клеток необходимо пополнить из ампулы основного банка клеток. Это должно быть сделано заблаговременно, чтобы можно было завершить контроль качества.
    5. Новый основной банк клеток должен быть подготовлен до того, как количество исходных основных клеток упадет ниже пяти ампул.
    6. Набор выполняемых тестов контроля качества зависит от предполагаемого использования, например: регулирующие органы могут потребовать дополнительных тестов, таких как вирусный скрининг и кариотипические исследования.

    Подготовка банка клеток — Eurofins Scientific

    Eurofins BioPharma Product Testing предлагает экспертные возможности для подготовки и определения характеристик большого количества банков клеток млекопитающих (включая стволовые клетки человека) и насекомых.Мы предлагаем основные производственные и рабочие ячейки GMP, непроизводственные основные и рабочие банки GMP и банки ячеек для исследований и разработок, а также банкинг для конечных производственных ячеек по запросу. В соответствии с требованиями EMA и / FDA мы выполняем все производственные банки клеток GMP в наших чистых комнатах без животных (AOF) и без животных. происходит.

    Почему выбирают Eurofins BioPharma для тестирования продуктов?

    • Наши возможности банковского обслуживания клеток и комплексные услуги по определению характеристик предоставляют единое решение для всех потребностей вашей клеточной линии.
    • Наши специалисты по сотовому банкингу обладают более чем 50-летним совместным опытом, предлагая постоянный надзор и мониторинг, а также постоянное устранение неполадок и обновление статуса во время расширения.
    • Мы предлагаем варианты длительного хранения с достаточной емкостью для паровой фазы LN2.

    Доступны услуги сотового банкинга

    Характеристики банка клеток

    • Идентификация
      • Определение размера CO1 / штрих-кодирование
      • Кариология
    • Микробный
      • Стерильность
      • Микоплазма / спироплазма
    • Приходящих вирусов
      • In vitro вирусное тестирование
      • In vivo Тестирование на вирус (субподряд с утвержденным поставщиком)
    • Специфические вирусы
      • Вирусы крупного рогатого скота
      • Вирусы свиней
      • кПЦР (полная человеческая панель)
      • Вирусы грызунов (MAP, HAP, RAP)
    • Ретровирусы
      • Анализ XC на экотропные ретровирусы
      • S + L- Анализ на ксенотропные ретровирусы
      • Электронная микроскопия для оценки банков клеток и культур
      • Совместное культивирование
      • PERT
    • Стабильность
      • Номер копии по qPCR
      • Картирование переваривания рестрикционного фермента с использованием метода Саузерн-блоттинга
      • Секвенирование ДНК по GMP
    • Услуги по секвенированию нового поколения
    • доступны в Eurofins BioPharma Product Testing в Мюнхене, Германия.

    Подготовка банка клеток

    • Приготовление основных и рабочих банков клеток cGMP млекопитающих и насекомых
    • Подготовка непроизводственных и исследовательских банков

    Хранилище сотового банка

    В дополнение к криогенным морозильникам LN2, предназначенным для производства банков клеток и краткосрочного хранения, у нас также есть дополнительная емкость для хранения паровой фазы LN2 для долгосрочного хранения банков клеток, включая криогенные морозильники LN2, которые:

    • Размещены на охраняемых территориях
    • Постоянно контролируется нашими проверенными системами мониторинга
    • С резервным управлением, круглосуточным мониторингом и резервными генераторами
    • Поддерживается полностью проверенной компьютеризированной системой управления лабораторной информацией о стабильности (LIMS).

    Оборудование и приборы

    • Наборы сотового банкинга класса A / B (один — AOF)
    • ISO5 / 7 Чистые помещения (оба без AOF)
    • Лаборатория клеточных культур BSL2
    • Квалифицированные морозильники с контролируемой скоростью
    • Сертифицированные инкубаторы на CO2
    • Автоматический подсчет клеток
    • Карантинная лаборатория

    CellBanking.

    net | Наука, биология, клеточная биология, клеточные линии, криоконсервация, услуги CRO, банковские услуги для клеток, тип клеток, трансфекция

    1.Что такое сотовый банкинг?

    Термин «банкинг ячеек» относится к процессу, посредством которого определенный тип ячейки реплицируется и сохраняется для последующего использования.

    Определение:

    Банк клеток: хранилище для замороженных образцов тканей, предназначенных для исследовательских целей и для хирургической реконструкции поврежденных структур тела.

    2. Как работает сотовый банкинг?

    Чтобы создать «банк» клеток, ученые выбирают тип клетки, который они хотели бы хранить.Затем они выращивают эту клетку в так называемой клеточной культуре. Как только из клетки-хозяина создается запас клеток, любой получает доступ к копиям ДНК этой клетки. См. Рисунок 1 для иллюстрации того, как это работает.

    Рисунок 1

    3. Что такое клеточная культура?

    Культура клеток — это просто искусственная среда, способствующая росту клеток. Обычно клетки помещают в контейнер, залитый раствором, содержащим всю необходимую «пищу», в которой нуждается клетка. Это позволяет ему расти в пределах контейнера, по крайней мере, до тех пор, пока не будет съедена вся еда.Большинство клеток, изученных таким образом, делятся и размножаются путем митоза, что гарантирует идентичность всех клеток в культуре. Это позволяет создать «запас клеток», из которого можно брать копии клетки-хозяина (см. Рисунок 1).

    Митоз: одна клетка становится двумя клетками.

    4. Что такое митоз?

    Митоз — это естественный процесс, при котором эукариотическая клетка разделяет свою ДНК на две идентичные структуры и делится на две отдельные индивидуальные клетки с одинаковой генетической структурой (ДНК).

    5. Что такое ксенотрансплантат?

    Ксенотрансплантация также называется «ксенотрансплантацией», когда ткань одного вида пересаживается или вставляется в другой вид. Ксенотрансплантация имеет множество практических последствий, будь то для научных исследований или потенциальных методов лечения различных проблем со здоровьем, включая, помимо прочего, рак, диабет, печеночную недостаточность и болезнь Паркинсона. Потенциал ксенотрансплантата для спасения жизней велик, но ткани одного вида могут быть трудными для восприятия ткани другого вида.Иногда новая ткань воспринимается как инородный захватчик, и организм отторгает ее. Несмотря на это, ксенотрансплантат — это новая захватывающая область биологии, и в ней постоянно наблюдается прогресс. Altogen Labs предлагает более 50 проверенных моделей ксенотрансплантатов рака.

    Определение

    Ксенотрансплантат: Хирургический трансплантат ткани одного вида к другому виду (или роду или семейству). Прививка от павиана человеку — это ксенотрансплантат. Приставка «ксено-» означает иностранный. Оно происходит от греческого слова «ксенос», означающего незнакомец, гость или хозяин.(Xeno- и xen- являются вариантами одного и того же префикса.)

    Клеточная культура.

    6. Что такое стабильная клеточная линия?

    Стабильная клеточная линия иногда синонимична клеточному фонду. Это успешно выращенная и скопированная серия идентичных клеток, специально подобранная в соответствии с ее типом клеток. Некоторые клеточные линии необходимо называть «стабильными», поскольку успешное копирование определенных клеток может оказаться трудным процессом из-за случайных мутаций, ошибок транскрипции и других факторов.Часто требуются полностью стерильные условия, чтобы избежать заражения, и сложное и / или дорогостоящее научное оборудование для обеспечения успеха, особенно для определенных типов клеток. В настоящее время компании предоставляют услуги по разработке 28-дневной стабильной клеточной линии, общие клеточные линии легко доступны для создания стабильно экспрессирующейся пользовательской клеточной линии.

    7. Что такое трансфекция?

    Трансфекция — это процесс искусственного введения генетического материала в клетки. Так родилось сочетание слов трансформация и инфекция, трансфекция.К сожалению, не существует единого реагента, набора или метода трансфекции, который можно было бы применить ко всем типам клеток; Эффективность трансфекции сильно различается в зависимости от используемого метода трансфекции, реагента, протокола и типа клеток. Компания Altogen Biosystems разработала наборы для трансфекции, специфичные для клеточных линий: Каждый набор содержит реагент для трансфекции, соответствующий типу клеток, реагент-усилитель трансфекции и рекомендуемый протокол трансфекции, что делает весь процесс относительно простым и доступным.

    8.Что означает in vivo / in vitro?

    In vivo (по-латыни «внутри живого») — это эксперименты с использованием целого живого организма, а не частичного или мертвого организма, или in vitro. («внутри стакана», т. Е. В тесте трубку или чашку Петри) в контролируемой среде. Испытания на животных и клинические испытания — это две формы исследования in vivo . Тестирование in vivo часто используется вместо in vitro , потому что оно лучше подходит для наблюдения за общими эффектами эксперимента на живом субъекте.Это часто описывается максимой in vivo veritas . In vitro (латинское слово «в стекле») относится к исследованиям в экспериментальной биологии, которые проводятся с использованием компонентов организма, которые были изолированы от их обычного биологического контекста, чтобы обеспечить более подробный или более удобный анализ, чем может делать с целыми организмами. В просторечии эти эксперименты обычно называют «экспериментами в пробирках». Напротив, термин in vivo относится к работе, которая проводится с живыми организмами в их нормальном, неповрежденном состоянии, а термин ex vivo относится к исследованиям функциональных органов, которые были удалены из интактного организма.Типичные примеры экспериментов in vitro включают:
    1. Клетки, полученные из многоклеточных организмов (культура клеток или культура ткани)
    2. Субклеточные компоненты (например, митохондрии или рибосомы)
    3. Клеточные или субклеточные экстракты (например, экстракты зародышей пшеницы или ретикулоцитов)
    4. Очищенные молекулы в пробирке (часто белки, ДНК или РНК, по отдельности или в комбинации)

    — Источник: Википедия

    9.Что такое сервисы RNAi?

    Услуги RNAi можно найти в Altogen Labs.

    10. В чем разница между рабочим банком клеток (WCB) и основным банком клеток (MCB)?

    Мастер-банк клеток представляет собой клетки, «замороженные во времени». В какой-то момент недавней истории тип клетки считался желательным для изучения, клонировался, обрабатывался и хранился в чрезвычайно холодных условиях, эффективно замораживая точные копии этого типа клеток. Процесс хранения обычно осуществляется с использованием небольших криопробирок, хранящихся в жидком азоте (LN 2 ), с использованием метода, называемого криоконсервацией.Рабочий банк клеток — это запас клеток, которые были или размораживаются и выращиваются в культуре клеток (эффективно клонированных), взятых из образца MCB, который считается чистым. Используя WCB, можно создать любое количество копий определенной клеточной линии. Обратите внимание, что образец ячеек в MCB не израсходуется, как только это будет сделано, для создания большего количества копий требуется только одна копия ячейки в MCB, поэтому MCB сохраняется. WCB и MCB — это не физические места, такие как Форт-Нокс, где большое количество клеток содержится под охраной, а, скорее, термины, используемые для описания работы многих ученых и организаций по всему миру, которые создали свои собственные независимые банки клеток. Для определения относительной чистоты клеточной культуры используются разные методы, например, есть способы проверить ее чистоту, идентичность и генетическую стабильность. Обратите внимание, что не все контрактные исследовательские организации (CRO) следуют одним и тем же правилам или проводят одни и те же типы тестов.

    11. Где я могу найти услуги мобильного банкинга?

    Продукты и услуги, связанные с банками клеток, криоконсервацией, линиями раковых клеток и первичными клетками, MCB, WCB, продуктами и услугами трансфекции, услугами CRO, моделями ксенотрансплантатов животных, услугами фарм / токсикантов, разработкой стабильных клеточных линий и другими темами, обсуждаемыми на этом сайт можно найти в нашем разделе ссылок.Производство

    Master Cell Bank | ATCC

    Разработка

    Master Cell Bank (MCB) и Working Cell Bank (WCB) — важнейшие процессы в производстве биологических материалов. Поскольку качество вашего конечного продукта зависит от качества клеток, используемых для его производства, при разработке основных банков клеток следует проявлять большую осторожность. При разработке MCB многое может пойти не так. Использование неподходящих и не охарактеризованных клеточных линий, генетическая изменчивость и контаминация клеточных линий — это лишь несколько возможных источников проблем.Наши процессы, опыт и услуги по развитию, которые мы предлагаем, решают все эти проблемы.

    Описание услуги разработки Custom Master Cell Bank (MCB):

    Предварительная разработка

    • Тестирование жизнеспособности клеточных линий
    • Испытание на загрязнение
    • Проверка идентификации (подлинности) клеток
      • STR, CO1, тестирование маркеров экспрессии поверхности
    • Разработка спецификации MCB (концентрация — общее количество клеток / флакон, объем на флакон, питательная среда, среда для замораживания, сыворотка, антибиотик, спецификации контроля качества)

    Развитие

    • Модификации клеточных линий (при необходимости)
    • Расширение клеточной линии
      • Выбор идеальной питательной среды и компонентов
      • Культивирование и субкультивирование
    • Оттаивание
      • Оценка и проверка методов консервации
      • Испытания токсичности криозащиты
        • Температура, концентрация, продолжительность и т. Д.
      • Исследование профиля охлаждения
    • Документация по процедурам, культурам и используемым реагентам

    Пост-разработка

    • Контроль качества после разработки
    • Хранение (паровая фаза жидкого азота)
    • Документация хранимых материалов (записи о поступлении, записи банковского обслуживания клеток, записи контроля качества, записи о подготовке партии носителей, записи о стерилизации).

    Служба банковского обслуживания сотовой связи: Master Cell Bank (MCB, WCB) поколения

    Cell Banking и GLP-совместимый Master Cell Bank (MCB и WCB) Поколение

    Создание банка клеток — жизненно важный элемент в производстве стабильных биологических продуктов. Системы банка клеток созданы, чтобы гарантировать сохранение однородной популяции клеток, поддержание их целостности и доступность достаточного количества материала в течение всего срока службы продукта. Тестирование биобезопасности проводится на клеточных линиях при нескольких пассажах.

    Тестирование биобезопасности обеспечивает однородный банк клеток и проверяет наличие мутаций и заражений. Тестирование включает в себя следующее:
    • Тестирование стерильности и ПЦР на вирусы
    • Тестирование на заражение вирусом, грибами или микоплазмой
    • Фингерпринтинг ДНК и проверка последовательности векторных конструкций

    Во время разработки клеточных линий, экспрессирующих моноклональные антитела, экспрессирующие векторы или рекомбинантные белки, клон используется в качестве источника для получения основного банка клеток (MCB).MCB имеют решающее значение для ранней фазы терапевтических разработок и производства на клинической и коммерческой фазах. В Altogen Labs мы следуем стандартной двухуровневой банковской системе клеток, в которой MCB расширяется для производства рабочего банка клеток (WCB) для повседневного использования в лаборатории. Система MCB / WCB имеет решающее значение для расширения производства терапевтических продуцирующих клеток и используется на более поздних этапах терапевтических разработок.

    Услуги

    Altogen Labs включают комплексную программу мониторинга окружающей среды, а также производство банков клеток, подходящих для исследований cGMP.Мы также предлагаем услуги сотового банкинга для производства товаров на рынке или изучения поздних стадий.

    Загрузить презентацию PowerPoint по услугам сотового банкинга Altogen Labs: [Загрузить]

    Master Cell Banking

    Клетки, которые продуцируют терапевтические антитела или другие представляющие интерес молекулы, создаются путем введения экспрессионных конструкций и векторов в геномы клеточных линий различных видов, включая клетки человека, клетки других млекопитающих, клетки насекомых и бактерии.Эти клетки обычно модифицируют посредством трансфекции или трансформации генов с последующими процессами выборочного скрининга, в которых экспрессия или ингибирование биологических характеристик (экспрессия белка, транскрипция мРНК и т. Д.) Используются для идентификации потенциально экспрессирующих ген клеток. После идентификации эти клетки используются для создания MCB и подвергаются криоконсервации для устранения загрязнения, биологической деградации и генетической изменчивости. Клеточные линии также как можно реже пассируют перед криоконсервацией (в дублированных флаконах), чтобы свести к минимуму потенциальное загрязнение и генетические вариации, которые могут возникнуть во время обработки.

    Рабочие сотовые банки

    Рабочие банки клеток обычно необходимы на более поздних стадиях разработки и производства потенциально терапевтических клеток. Обычно WCB получают путем расширения одного флакона MCB, который был охарактеризован на предмет жизнеспособности и прошел несколько пассажей. В Altogen Labs уже имеется ряд MCB и WCB, в том числе:

    • Клетки насекомых
    • Клетки млекопитающих
    • Клетки грызунов

    Мониторинг и безопасность

    Altogen Labs предлагает долгосрочное хранение клеток в безопасной, контролируемой и контролируемой среде. Банки клеток выполняются в сертифицированных ламинарных шкафах биобезопасности класса II с воздухом, отфильтрованным HEPA. Клетки выращивают только в предварительно откалиброванных инкубаторах с ультрафиолетовой (УФ) защитой воздуха и воды.

    Банки ячеек разделены и хранятся в отдельных морозильных камерах для предотвращения потери из-за неисправности морозильной камеры. Система мониторинга круглосуточно подтверждает надлежащий уровень жидкого азота и температуру в морозильной камере. Полностью дублированная система резервного копирования обеспечивает безопасность хранилища. Мы подтверждаем, что клеточные линии не содержат микоплазм и бактериального загрязнения.

    Банк клеток (или индивидуальные криопробирки) отгрузка

    Altogen Labs использует материалы в соответствии с требованиями клиента.

    Altogen Labs может отправить банки сотовых ячеек непосредственно клиенту или указанному третьему лицу, или в любое место по всему миру.

    Чтобы узнать цену, свяжитесь с нами по адресу [email protected] com или позвоните в Altogen Labs по телефону 512-433-6177.

    Получить расценки на услугу
    Cell Banking:
    Master Cell Bank (MCB, WCB), поколение


    см. Также:
    Служба криоконсервации и банкинга клеток (соответствует требованиям GLP)

    банка клеток линии клеток HEK293T для производства лентивирусных частиц клинического качества | Translational Medicine Communications

    Система качества

    Система качества Creatio работает в соответствии с действующими правилами GMP и авторизована Испанским агентством лекарственных средств и медицинского оборудования (PE010-1570, AEMPS, Испания).В Creatio действует определенная организационная структура. Функции и обязанности каждого сотрудника предприятия четко определены и задокументированы. Кроме того, в Creatio внедрена специальная система управления документами, которая включает в себя: подходы к оценке рисков, документацию по контролю изменений, записи об инцидентах и ​​несоответствиях, годовую стратегию калибровки, валидации и квалификации, программы аудита, программы обучения персонала, системы профилактического обслуживания, реагенты и исходные материалы. запись и прослеживаемость, управление контролем качества, управление производством, сертификация партий и система выпуска.

    Помещения и оборудование

    Creatio — это академический центр Университета Барселоны, занимающийся проверкой и производством ATMP для их использования в клинических испытаниях фазы I / II. В учреждении есть 4 чистых помещения класса B, в которых все процедуры могут выполняться в кабинете с ламинарным потоком класса A. MCB и WCB клеточной линии HEK293T (CRL-11 268; ATCC, Мансасса, Вирджиния, США; получено в соответствии с лицензионным соглашением между Университетом Рокфеллера и Клинической больницей Барселоны; 17 октября 2016 г.) обрабатывались в чистом помещении, предназначенном для клеточной терапии. .Доступ в чистое помещение состоит из входа в комнату для предварительной уборки (класс D), в комнату для предварительной уборки (класс C), раздевалку (класс B) и дистрибьютора (класс B) (рис.1). . Смежные комнаты находятся под разным давлением (Δ10–15 Па между комнатами), достигающим 50 Па в чистом помещении класса B. На предприятии Creatio есть два складских помещения (уровень D) и помещение для кондиционирования продукта класса D. Давление, температура и влажность постоянно контролируются и регулируются специальным управляющим программным обеспечением (Controlli Delta Spain, Барселона, Испания).Объект проходит валидацию один раз в год в соответствии с конкретными процедурами управления валидацией. Оборудование проходит валидацию и калибровку в соответствии с заранее определенным годовым планом. Параметры инкубаторов, холодильников, морозильников, морозильников, резервуаров с азотом и инкубаторов клеток. Уровни CO 2 постоянно контролируются специальным программным обеспечением (Sirius, Nirco, Rubí, Испания).

    Рис. 1

    Схема GMP-объекта Creatio. Объект управляется тремя независимыми системами отопления, вентиляции и кондиционирования воздуха (ОВК) (оранжевый, синий и зеленый).В белых, не засекреченных областях. Оранжевым цветом — HVAC-1. Синим цветом — ОВК-2. Зеленым цветом — ОВК-3. Помещения, принадлежащие ОВК-3, имеют давление 10 Па и предназначены для хранения и кондиционирования продуктов. Продукция клеточной терапии производится в HVAC-1. Чистые помещения (класс B), принадлежащие HVAC-1, имеют давление 50 Па, в соседних помещениях перепад давления составляет 10-15 Па. HVAC-2 предназначен для продуктов генной терапии. Доступ к чистым помещениям для генной терапии (класс B) предоставляется через раздевалки с перепадом давления 10–15 Па.В этом случае чистая комната класса B находится под давлением (30 Па) по сравнению с соседней раздевалкой (40 Па) в качестве физического барьера для предотвращения распространения вируса

    Источник HEK293T и спецификации линии клеток

    Линия клеток HEK293T, которая экспрессирует большой антиген Т обезьяньего вируса 40 (SV40) был получен в Университете Рокфеллера из линии клеток HEK293. Согласно сертификату анализа продукт, полученный из ATCC, имел номер пассажа 17. Кроме того, в сертификате анализа клеточной линии HEK293T указаны результаты тестов микробиологического контроля качества, анализа коротких тандемных повторов (STR) и Анализ на основе ПЦР на патогенные вирусы человека: ВИЧ, HepB, HPV, EBV, CMV.Эта информация была задокументирована и использована в качестве отправной точки нашего процесса, и никаких дополнительных манипуляций между покупкой клеточной линии и ее использованием для банковского хранения клеток не производилось.

    Идентификация клеточной линии

    Был проанализирован следующий STR-профиль клеточной линии HEK293T: амелогенин: X, CSF1PO: 11, 12; D13S317: 12, 14; D16S539: 9, 13; D5S818: 8, 9; D7S820: 11; THO1: 7, 9,3; TPOX: 11; vWA: 16, 18, 19.

    Культура клеток HEK293T

    Клетки HEK293T инкубировали в течение 2 мин при 37 ° C в термоблоке и быстро переносили в пробирку, содержащую DMEM (Thermo Fisher Scientific, Walthman MA, США) с добавлением 10 % фетальной бычьей сыворотки (FBS) (Thermo Fisher Scientific).Затем клетки центрифугировали (1250 об / мин, 5 минут), супернатант удаляли и клетки ресуспендировали в свежей культуральной среде для подсчета клеток на основе трипанового синего. Клетки высевали в стерильную апирогенную колбу при плотности 1 × 10 6 клеток x 25 см 2 и инкубировали при 37 ° C / 5% CO 2 в течение 3-4 дней, пока клетки не достигли 80 % слияния. Для пассирования клеток израсходованную культуральную среду удаляли и клетки промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) (Thermo Fisher Scientific).Добавляли TrypLE ™ (Thermo Fisher Scientific) и инкубировали в течение 1 мин для отделения клеток от колбы. После отделения клетки переносили в пробирку, содержащую свежую среду, и центрифугировали (1250 об / мин, 5 мин). Клетки подсчитывали, снова центрифугировали (1250 об / мин, 5 мин) и высевали при плотности 1 · 10 6 клеток · 25 см 2 в необходимое количество колб размером 25 или 75 см 2 . Проходы клеток были сделаны для достижения более 200 · 10 6 клеток для MCB и 1000 · 10 6 для WCB.

    HEK293T криоконсервация

    Как только необходимое количество клеток было достигнуто, клетки центрифугировали (1250 об / мин, 5 мин) и осадок ресуспендировали в среде криоконсервации для достижения плотности 10 · 10 6 клеток / мл для MCB и 20 · 10 6 клеток / мл для WCB. Среда для криоконсервации состояла из 95% среды для культивирования клеток (10% DMEM с добавлением FBS) и 5% ДМСО (Scharlab, Setmenat, Испания). Криопробирки были должным образом промаркированы и наполнены 1 мл необходимой концентрации.Криопробирки транспортировали из чистого помещения в зону криоконсервации, и во время транспортировки контролировали температуру. Криоконсервацию проводили в морозильной камере с контролируемой скоростью (Criomed ™, Thermo Fisher Scientific) по программе замораживания, которая понижает температуру на 1 ° C / мин. Затем полученные криопробирки были перенесены в резервуар с газовой фазой с азотом при -180 ° C ± 20 ° C.

    Обучение и валидация персонала

    Creatio принимает постоянную программу обучения персонала.Производственный персонал также проходит аттестацию и аттестацию каждые 6 месяцев с помощью имитационных испытаний текущих производственных процессов. Персонал, задействованный в производстве MCB и WCB, провел три последовательных имитационных испытания перед началом производственного процесса. Среду триптического соевого бульона (TSB; Becton Dickinson, Мадрид, Испания) использовали для проведения имитационных тестов. Имитационные испытания были разработаны с учетом всех этапов процесса и с упором на наихудшие сценарии и проводились с теми же материалами и оборудованием, которые использовались для производства MCB и WCB.Во время симуляционных испытаний постоянно контролировалось присутствие переносимых по воздуху микроорганизмов и частиц в соответствии со стандартами GMP. Чтобы проверить поддержание асептических условий в процессе моделирования, точки отбора проб были установлены в начале и в конце процесса (отрицательный контроль и моделирование конечного продукта, соответственно).

    Мониторинг окружающей среды

    Лазерный счетчик частиц (CLiMET, Редлендс, Калифорния, США) использовался для отслеживания взвешенных в воздухе частиц в шкафу (класс A) во время производственного процесса и во время испытаний моделирования.Согласно действующим правилам GMP, максимально допустимые концентрации частиц в воздухе в зонах класса A следующие: размер частиц равный или более 0,5 мкм, 3520 частиц на м 3 ; размер частиц 5 мкм или более, 20 частиц на м 3 [15].

    Отстойные планшеты (Becton Dickinson) использовались для мониторинга присутствия переносимых по воздуху микроорганизмов (бактерий и грибков) в шкафу (класс A) во время производственного процесса, а также во время испытаний моделирования.Кроме того, в конце каждого рабочего дня отбирались отпечатки перчаток (мазки пальцев) сотрудников категории А для микробиологического анализа (Becton Dickinson). В соответствии с действующими правилами GMP были установлены критерии приемлемости менее 1 колониеобразующей единицы (> 1 КОЕ / перчатки и> 1 КОЕ / чашку) [15].

    Оценка риска продуктов животного происхождения и случайных вирусов

    В соответствии с правилами GMP следует избегать использования продуктов животного происхождения в производственном процессе.Кроме того, необходимо контролировать использование веществ животного происхождения, чтобы избежать передачи патогенов конечному продукту. В этом смысле единственным продуктом животного происхождения, использованным в данной работе, была фетальная бычья сыворотка (FBS) (Thermo Fisher Scientific) австралийского происхождения, сертификат анализа которой указывает на отсутствие вируса блютанга, аденовируса крупного рогатого скота, парвовируса крупного рогатого скота, респираторного вируса крупного рогатого скота. синцитиальный вирус, вирус вирусной диареи крупного рогатого скота, гемадсорбирующие агенты, вирус бешенства, реовирус и вирус губчатой ​​энцефалопатии.Учитывая, что FBS является единственным реагентом животного происхождения, используемым в процессе производства банка клеток, можно гарантировать, что производственный процесс не вводит вирусы животных в конечный продукт. Однако для большей безопасности конечный продукт проводится тест на случайные вирусы, как описано ниже.

    Проверка процесса MCB и WCB

    Одна криопробирка, содержащая клетки HEK293T, была разморожена и разделена на три популяции HEK293T, которые были независимо увеличены для получения трех запасов клеток для MCB.Каждую партию HEK293T увеличивали до концентрации 200 · 10 6 клеток. Каждая партия состояла из не менее 20 криопробирок, всего ≥ 60 криопробирок для MCB. Тесты контроля качества проводились для каждой партии MCB. Из MCB были приготовлены три последовательные и независимые партии WCB. Клетки HEK293T из MCB оттаивали и размножали до концентрации 1000 · 10 6 клеток. Каждая партия WCB состояла из не менее 50 криопробирок, всего ≥ 150 криопробирок для WCB.Тесты контроля качества проводились для каждой партии WCB.

    Тест на стерильность и тест на стимуляцию роста

    Клеточные культуры и среды TSB подвергали тесту на стимуляцию роста в соответствии с гл. 2.6.1 Европейской фармакопеи, чтобы гарантировать соответствие питательной среды надлежащим требованиям стерильности.

    Испытания на стерильность образцов TSB, MCB и WCB были выполнены с использованием метода прямого посева, описанного в гл. 2.6.1 и 2.2.27 Европейской фармакопеи [16].

    Тест на микоплазму

    Набор Venor®GeM qOneStep (Minerva Biolabs®, Берлин, Германия) использовался для обнаружения и идентификации микоплазм в образцах TSB, MCB и WCB.Метод основан на амплификации кодирующей области рРНК Mycoplasma 16S в соответствии с методом, описанным в гл. 2.6.7 Европейской фармакопеи [16].

    Тест кариотипа

    Кариотип определяли окрашиванием G-полосы. HEK293T засевали и инкубировали до 80% слияния. 12 мкл KaryoMAX ™ Colcemid ™ (Thermo Fisher Scientific) разбавляли в 6 мл DMEM. Затем к культуре клеток добавляли 6 мл рабочего раствора KaryoMAX ™ Colcemid ™ и инкубировали при 37 ° C / 5% CO 2 в течение часа.Среду для культивирования клеток удаляли и клетки промывали 3 мл PBS (Thermo Fisher Scientific). После удаления PBS добавляли 1 мл TrypLE ™ (Thermo Fisher Scientific) и клетки инкубировали в течение 1 минуты при 37 ° C. Затем добавляли 5 мл культуральной среды и клетки собирали центрифугированием в течение 5 минут при 1250 об / мин. После удаления супернатанта осадок промывали PBS и снова центрифугировали в течение 5 минут при 1250 об / мин. К клеткам осторожно добавляли 10 мл предварительно нагретого (37 ° C) 0,075 М раствора KaryoMAx ™ KCl и после 10 минут инкубации при 37 ° C клетки фиксировали фиксирующим раствором Карнуа.

    Тестирование на случайные вирусы

    Тестирование на случайные вирусы основано на анализе цитопатических эффектов в клетках-хозяевах. Образцы клеток HEK293T из MCB и WCB разрушали встряхиванием с шариками из нержавеющей стали диаметром 0,2 и 3 мм. Гомогенат клеток центрифугировали (1250 об / мин, 5 мин, 4 ° C), добавляли 0,9 мл супернатанта к культурам клеток MR5, VERO и RD (Vircell, Гранада, Испания) и инкубировали при 35–37 ° C. Культуры клеток анализировали через 14 дней после инокуляции. Положительный и отрицательный контроли были включены в анализ.ПЦР в реальном времени для идентификации энтеровируса проводили на образцах без цитопатических эффектов.

    In-Process Controls (IPC): морфология клеток, слияние и жизнеспособность клеток

    Морфология клеток, слияние клеток и жизнеспособность клеток использовались в качестве IPC в течение всего процесса генерации MCB и WCB. Морфологические исследования клеток HEK293T и слияния клеток проводили визуально под микроскопом. Тест исключения трипанового синего проводили на каждом этапе пассажа клеток для проверки жизнеспособности клеток.Образцы с жизнеспособностью <80% не использовались на следующих этапах производства.

    Об авторе

    alexxlab administrator

    Оставить ответ