Авить: Доступ ограничен: проблема с IP
Общайтесь с клиентами Авито в Jivo
Общайтесь с клиентами Авито в JivoИнтеграция
Добавьте Авито в приложение Jivo, чтобы быстрее реагировать на вопросы покупателей и не отпускать их к конкурентам
Не теряйте клиентов с Авито
Авито — популярный сайт объявлений с аудиторией более 47 миллионов посетителей в месяц.
Иногда клиент хочет уточнить наличие товара или задать вопрос. И если он вовремя не нашёл ответ, то перейдёт к следующему объявлению, а вы — потеряете покупателя.
Добавьте Авито в приложение Jivo, чтобы быстро реагировать на вопросы клиентов и не отпускать их к конкурентам. Все сообщения будут доступны в едином приложении, и вам не придётся переключаться между множеством вкладок.
Воспользуйтесь
преимуществами Jivo
Все сообщения в одном приложении
Поэтому вашим сотрудникам больше не придется переключаться между вкладками. А значит, они смогут обработать больше заявок и повысить продажи.
Статистика по работе команды
В Jivo вы в любой момент сможете получить статистику по входящим и пропущенным сообщениям, прочитать диалоги операторов и оценить скорость ответа. И если что-то пойдёт не так — вовремя скорректировать работу команды.
Долгосрочные
отношения с клиентом
Возможности встроенной CRM позволят вам построить долгосрочные отношения с покупателем. Все данные будут синхронизированы и вы не упустите ни одного клиента.
Простая
настройка
Подключение Авито в Jivo не требует дополнительных навыков и займёт буквально пару минут. Нужно нажать всего четыре кнопки (мы посчитали!)
Подключите Авито бесплатно
Возможность бесплатно работать с Авито доступна на всех тарифах Jivo.
Подключите новый канал прямо сейчас:
1
Откройте
приложение
Jivo
2
3
Разрешите Jivo
доступ к учётной
записи Авито
4
Отвечайте
на сообщения в Jivo
и повышайте продажи
Добавьте Авито в приложение Jivo
Это бесплатно и займет всего пару минут
Зарегистрируйтесь если не являетесьпользователем Jivo Продолжая пользоваться сайтом, я даю согласие на использование файлов cookie.
Отклонить Принять
Ролик «Авито Недвижимости» с Маэстро Евгением Понасенковым признан лучшим вирусным видео
27 октября в Москве состоялась церемония награждения Re-Movie Awards — первого фестиваля видеорекламы и кинематографа в сферах строительства и недвижимости. Из 18 представленных номинаций «Авито Недвижимость» приняла участие в двух — «Ловец сетей» (лучшая реклама в интернете) и «Здоровый вирус» (лучший вирусный ролик). Как рассказала Sostav команда проекта, компания одержала победу во второй номинации, представив ролик с Маэстро Евгением Понасенковым в главной роли. Номинация присуждается за видео, активно распространяемое пользователями по собственной инициативе на своих личных страницах в соцсетях и на других платформах.
Напомним, историк Евгений Понасенков стал широко известен после появления в сети ролика, в котором он беззаботно прогуливается по лесу под трек Ride It. Для зрителей он стал символом спокойствия и непринужденности на фоне повседневной суеты.
А победителем премии стал ролик, в котором Маэстро в полюбившейся зрителям манере осматривает изысканную квартиру в английском стиле. При этом он обращает внимание на ее историю и уникальные детали интерьера, которые подойдут эстетам, например на камин, в котором можно «сжигать комментарии завистников».
Екатерина Макарова, менеджер по маркетингу С2С-направления «Авито Недвижимости»:
В этой кампании нам важно было охватить новый пласт аудитории, показать преимущества сервиса «Авито Недвижимость» глазами харизматичного эстета и гедониста, стиль жизни которого вызывает интерес у зрителя и собирает немало поклонников. Также нам важно было стать первым крупным рекламодателем среди брендов, привлекающих Евгения Понасенкова, потому что он идеально подошёл для трансляции основной идеи нашей рекламной кампании. «Квартиры с харизмой» — это жильё, наполненное смыслом, несущее в себе особые ДНК и ценностный ряд. Аудитория Евгения — люди 25−35 лет, которым близок подход Маэстро и его стремление наполнить жизнь определенной эстетикой.
И это достаточно взрослая аудитория, которая, как правило, уже осознает свои предпочтения и задумывается о покупке недвижимости.
Видео было создано в рамках рекламной кампании «Авито Недвижимости» «Квартиры с харизмой», которая стала первым опытом сотрудничества с крупным брендом для Евгения Понасенкова.
Евгений Понасенков, историк, инфлюенсер:
Я рад этой победе, потому что речь идет о свободном выборе людей. Но привлекая аудиторию, мне важно ее просвещать, обучать эстетике и достижениям нашей цивилизации. При этом все надо делать с легкостью весенней волны на юге Италии. Самую сложную информацию всегда можно и нужно подавать красиво и весело. Мне очень приятно, что компании и люди, которые со мной сотрудничают или у меня учатся, становятся очень успешными.
Жюри премии фестиваля Re-Movie Awards оценивало ролики по оригинальности концепции, количеству распространений, заметности события, считываемости бренда в итоговом продукте, а также по уровню качества графики и монтажа. Мероприятие проводится при поддержке Комплекса градостроительной политики и строительства города Москвы. В состав жюри вошли продюсер реалити-проектов телеканала «Пятница» Пелагея Голуб, режиссер клипов и рекламы, лауреат «ТЭФИ» Николай Рыкунов, директор по производству «МТС-Медиа» Максим Филатов и другие профессионалы отрасли.
Екатерина Макарова, менеджер по маркетингу С2С-направления «Авито Недвижимости»:
Все поставленные цели достигнуты. Ролик стал частью большой рекламной кампании в social media, которая призвана пробудить интерес к вторичному жилью в Москве. Мы получили широкий медийный охват, рекордное количество просмотров и переходов по ссылкам, а также большое количество положительных комментариев целевой аудитории, которая высоко оценила выбранный подход.
Помимо основного видео, кампания включала интервью Маэстро с известным поэтом, писателем и публицистом Дмитрием Быковым. В выпуске его программы ЖЗЛ на YouTube ведущий с ностальгией поделился воспоминаниями о квартирах, в которых он когда-то жил.
Кроме того, на своих каналах в Instagram и Tik Tok Маэстро провел стрим, где в прямом эфире просматривал и описывал найденные на «Авито» квартиры, которые придутся по нраву эстетам и ценителям роскоши.
Общий охват кампании превысил 7,7 млн просмотров, она шла с 26 июня по 6 августа этого года. Для реализации было привлечено креативное агентство Asap Digital.
Состав творческой группы:
«Авито»:
Product marketing manager RE: Екатерина Макарова
SMM Senior RE: Ксения Крутова
Event manager RE: Екатерина Киселева
Asap Digital:
Project Manager: Юлия Мацковская
Head of creative: Всеволод Сидоров
Creative manager: Юлиана Михайлова
Senior Designer: Ольга Фукс
Targeting manager: Алина Сафина
Продакшн: Ирина Круглова (оператор, монтаж), Виктор Никишов (фотограф)
Вся полезная информация об Avito здесь
Вы в клубе друзей Avito!
Тех, кто уже оценил на собственном опыте эффективность использования Avito для самых разных целей – от продажи личных вещей до продвижения собственного бизнеса.
И всё благодаря самой популярной торговой площадке в Рунете, объединившей 35 млн пользователей.
С момента появления в 2007 году Avito стал одним из крупнейших сайтов объявлений в стране. И если вам нужно что-либо продать, купить, найти услугу или сотрудника, огромная аудитория заинтересованных людей уже ждет вас на Avito. И это не просто желающие пообщаться, а «готовые» покупатели, продавцы и соискатели. Дополнительные плюсы – это простота использования, удобные мобильные приложения и сервисы.
Не секрет, что Avito – это отличная площадка для развития своего бизнеса. С каждым годом предпринимателей, оценивших огромный потенциал этого ресурса, становится всё больше. Сейчас около 0,5 млн постоянных пользователей активно продвигают свои товары и услуги на Avito. В нашем блоге мы соберем накопленный опыт, поделимся с вами успешными кейсами и инструментами для эффективной работы. Мы хотим держать вас в курсе всех изменений и новостей, отвечать на ваши вопросы и получать живой отклик в комментариях о том, как сделать работу с Avito еще продуктивнее.
Цель нашего блога – собрать всю нужную и достоверную информацию о работе с Avito, рассказать обо всех «фишках» и возможностях этого ресурса, знакомить вас с новыми методиками работы и программными продуктами, которые выведут бизнес на новый уровень.
Реальные цифры, авторитетные мнения
Мы хотим избавить вас от необходимости изучать бесконечные разрозненные и, порой, недостоверные материалы в поисках действительно ценной информации. В нашем блоге вы найдете реальные цифры и достоверную статистику Avito по разным направлениями бизнеса. Помимо этого, здесь мы будем размещать:
- постоянный мониторинг обновлений в сфере развития бизнеса на Avito
- авторитетные мнения Рунета из проверенных источников
- ответы на часто возникающие вопросы о работе с Avito
- лучшие бизнес-кейсы и опыт успешных предпринимателей
- обзор эффективных программных продуктов для работы с Avito
Надеемся, что собранная здесь информация поможет каждому пользователю Avito достичь своей цели.
Совсем скоро наш проект будет удобно смотреть и обсуждать в соц. сетях. Если вы еще не с нами, присоединяйтесь, мы поделимся опытом и секретами успешной работы с Avito!
Совсем скоро наш проект будет удобно смотреть и обсуждать в соц. сетях. Если вы еще не с нами, присоединяйтесь, мы поделимся опытом и секретами успешной работы с Avito!Безопасный поиск. «Авито Работа» отвечает на вопросы читателей | Карьера и бизнес | Деньги
После того как Дмитрий Пучков, руководитель по развитию ведущего в России сервиса по поиску вакансий «Авито Работа», рассказал АиФ.ru, какие параметры сервис берёт на контроль при проверке благонадёжности работодателей, и дал советы тем, кто хочет найти работу, наши читатели прислали много вопросов на эти темы. Мы показали их Дмитрию и сегодня публикуем его ответы.
Как проверяют работодателей?
Если работодатель не прошёл вашу проверку по какому-то параметру, то он просто не получит отметку «компания проверена»? Но при этом на вакансии от этой компании можно будет откликнуться?
Александр
Отметку «Компания проверена» на «Авито» получают работодатели и кадровые агентства, прошедшие проверку благонадёжности юридического лица через указание ИНН.
Если работодатель по каким-то причинам пока не предоставил данные, значка у него не будет. Вакансии при этом остаются, откликнуться на них можно. При этом мы постоянно взаимодействуем с работодателями, предлагаем им пройти проверку. Сейчас почти половина вакансий на сервисе с отметкой о благонадежности.
А может быть так, что вашу проверку работодатель прошёл некоторое время назад, но сейчас компания испытывает большие финансовые трудности? Насколько информация о компаниях на портале актуальна и как часто работодатели проходят такие проверки?
Иван
— Данные о работодателях перепроверяются в автоматическом режиме, информация берётся из системы проверки контрагентов СПАРК. Если изменился ИНН юридического лица, то компания должна вновь пройти процедуру верификации и проверки благонадёжности.
Работодатель может лишиться отметки «Компания проверена» в случае систематического нарушения Трудового кодекса и правил «Авито».
Как определить, что работодатель добросовестный?
Наталья
Выбирайте вакансии, в которых указана подробная информация о должности, включая требования к соискателю, нужные навыки, уровень оплаты, график и условия работы. Общие слова в описании — признак несерьезного предложения. Какие фразы должны насторожить: «заработок неограничен», «опыт не требуется», «быстрый карьерный рост».
Если же вы обнаружили подозрительное объявление, сообщите нам об этом с помощью кнопки «Пожаловаться». Каждая поступающая жалоба проходит дополнительную проверку: у нас есть внутренние аналитические системы, которые могут определять, реальна ли жалоба, а также жалобы проверяются объективными источниками (например, тайными покупателями), исключая таким образом злоупотребление. «Авито» тщательно следит за тем, чтобы обеспечить нашим пользователям надежную платформу.
Искал работу и столкнулся с ситуацией, когда меня отказывались оформлять по договору и предлагали зарплату в конверте. Возможно ли отдельно отмечать таких работодателей?
Дмитрий
— Разногласия между работником и работодателем регулирует Трудовой кодекс, а рассматривают их специальные комиссии, суды или Гострудинспекция. Если вы столкнулись с работодателями, которые не оформляют официально трудовые отношения, задерживают зарплату, навязывают неудобный график или вынуждают выполнять дополнительные обязанности, не указанные в вакансии, рекомендуем обратиться в соответствующие органы. И обязательно напишите отзыв о вашем опыте, это поможет другим кандидатам сделать правильный выбор.
Достоверны ли жалобы?
Могут ли пользователи повлиять на работодателя, возможно ли злоупотребление в связи с личными обидами?
Светлана
— Когда вы решаете вопрос трудоустройства, мы рекомендуем узнавать отзывы сотрудников о компании и о самой должности, чтобы понять, подходит ли такая работа именно вам.
Понятно, что мнения пользователей могут быть абсолютно противоположными. Но тут нужно учитывать, много ли людей высказываются не в пользу работодателя, насколько эти отзывы кажутся надуманными или реальными. Возможно, среди сотрудников интересующей компании найдутся ваши знакомые, которым вы можете доверять. Словом, «Авито» проверяет работодателей, но и вы можете провести своё мини-расследование, чтобы принять решение.
Как устроиться к порядочному работодателю?
Хочу устроиться к порядочному работодателю. Бывало, что неделю работал, потом не платили деньги и говорили: «Не нравится? Уходи». Как этого избежать?
Виталий
— Хорошая вакансия может попасться и в небольшом локальном паблике или на столбе объявлений, однако безопаснее искать работу на известных, зарекомендовавших себя ресурсах. Все нюансы трудоустройства нужно уточнять ещё до выхода на рабочее место: конкретные обязанности по должностной инструкции, частоту выплат, график работы, условия непосредственно на рабочем месте.
До подписания трудового договора следует внимательно прочесть и сам документ, и дополнительные соглашения к нему. Вместо трудового договора вам могут предложить заключить договор гражданско-правового характера (ГПХ). В этом случае между вами и работодателем не возникнет трудовых отношений, которые регулируются Трудовым кодексом. Если это вас это не устраивает, лучше подыскать другое место.
Дайте, пожалуйста, рекомендации: какие вопросы лучше задавать, чтобы устроиться к благонадежному работодателю и сохранить свое время и нервы?
Юлия
— Если вам приглянулась вакансия, для начала поищите в интернете отзывы работников о компании. Конечно, сотрудники всегда оставляют и положительные, и отрицательные отзывы. Но, если жалоб слишком много, лучше подыскать другое место.
На встрече с работодателем уточните, каким будет ваш график, оформят ли трудовой договор, как часто будут платить зарплату, от чего зависит размер выплат, нужно ли работать сверхурочно.
Подробно расспросите об обязанностях, которые вам придётся выполнять, и об условиях, в которых предстоит работать. Например, есть ли столовая, уточните внутренние регламенты по использованию техники, а также предполагается ли обучение или повышение квалификации.
Наталья
— На «Авито» есть фильтры, с помощью которых можно выбирать вакансии по сферам деятельности (производство, образование, медицина, туризм и т. д.), по графику работы (неполный день, удалённый формат и т. п.), по опыту работы и по размеру зарплаты. Один из фильтров даёт возможность выбора по возрасту: для кандидатов от 14 лет или старше 45 лет. Поставив галочку напротив нужной категории, можно получить соответствующий список предложений трудоустройства. В Волгограде на сегодня 22% размещённых на «Авито» вакансий подходят соискателям возраста 45+.
На правах рекламы
AviTool генератор объявлений для Avito.ru
Виртуальная доска объявлений Авито по праву считается лучшей в своей отрасли. Благодаря этому ресурсу, миллионы людей продали товар, нашли работу, завели полезные знакомства.
AviTool — мощная программа, позволяющая автоматизировать процесс подачи объявлений через Avito.ru. Можно настраивать количество опубликовываемых объявлений. Кроме того существует возможность производить их редактирование, уничтожение и увеличение сроков публикации. Для того, чтобы пользоваться данной программой нужно создать несколько аккаунтов, а потом подавать объявления с них. Программа позволяет работать с языком XML, благодаря которому можно вставлять в программу товары из различных баз данных.
Возможности AviTool генератора объявлений
В AviTool имеется возможность для импортирования различных видов файлов, содержащих базы данных.
В программе предусмотрен весьма внушительный список различных возможностей по подаче объявлений. В частности можно задавать изображения вместе с текстом. Существует возможность изменять и продлевать опубликованное объявление. Если объявление относится к одному виду товара, то имеется возможность его обновления. В этом случае то объявление, которое было до этого, просто удаляется. Для каждого опублиокованного объявления предусмотрен список картинок, из которых можно выбирать те, которые относятся к данному сообщению. Если к объявлению относятся несколько картинок, то они выбираются в случайном порядке среди существующих. При этом процесс добавления изображений к вашим объявлениям может быть автоматизирован.
Всё дело в том, что картинки могут храниться либо в компьютере, либо на сервере. Так вот, если они хранятся на сервере, например, в вашем интернет-магазине, то они могут автоматически загружаться на электронную доску объявлений. Все опубликованные записи на авито могут носить частный характер или исходить от различных организаций. Объявления могут размещаться на верхних позициях авито.Программа способна подключаться к специальным серверам для ввода капчи. Например, к таким как антигейт. В этом случае капча вводится в автоматическом режиме, а иначе приходится вводить её вручную.
Если капча вводится неверно, то Антигейт не списывает деньги с баланса пользователя.
База данных с объявления может храниться в специальном XML-файле или в книге Microsoft Excel.
Все действия в программе AviTool могут сохраняться в отдельный проект, который затем сохраняется на диске. Пользователь может в любой момент обратиться к этому проекту, а затем вновь продолжить работу. Предусмотрен специальный планировщик, который запускает
Благодаря использованию данной программы стало возможным автоматически генерировать аккаунты на авито и имена пользователей. Как известно, для использования Авито нужно вводить номера телефонов. Так вот теперь стало возможно генерировать номера телефонов через AviTool и при этом использовать коды реально существующих операторов.В AviTool возможна генерация реально существующих регионов проживания, включая города. Все эти места находятся в базе данных сайта avito.ru и берутся оттуда программой.
Вся информация о действиях пользователя в программе генерируется в специальные отчёты, которые формируются в специальные выходные файлы. Это необходимо для того, чтобы потом можно было отследить всю информацию. Её изучение может быть очень полезным, если вдруг понадобиться отследить какие-то нежелательные изменения, произошедшие по вине пользователя. В общем, сделано всё для удобства работы. Кстати , через рабочие логи можно перейти к самим объявлениям на авито. Очень полезно.
В редактор объявлений встроена специальная функция перебора слов.
Благодаря ей можно исправлять различные речевые ошибки. Также автоматически исправляются ошибки пунктуации, орфографии, оформления текста и многое другое.Всё что пользователь делает в сети через программы, подобные AviTool, может привести к блокировке аккаунта. Для этого в них встроена система, симулирующая деятельность реального человека. При помощи прокси-серверов программа способная скрыть реальная ip-адрес пользователя. Также возможности программы позволяют выдавать ложную информацию об операционной системе пользователя, используемом браузере. Все операции на Авито оставляют следы в виде cookies-файлов, поэтому AviTool имеет встроенную функцию, позволюящую очищать браузер от этих файлов, скрывая действия пользователя. Робот, которым является программа, может публиковать объявления за долю секунды. Массовое появление сообщений с одного аккаунта сразу насторожит администрацию. Именно поэтому в AviTool встроена функция специальной временной задержки. Здесь опять же создаётся иллюзия реального пользователя.
Каждому созданному аккаунту привязывается свой ip-адрес, который создаётся прокси-сервером. Также к такому адресу привязывается телефон пользователя.В результате мы получаем отличную программу, которая позволяет использовать авито для серьёзного заработка денег. Это может быть полезным владельцам виртуальных магазинов. Ей могут пользоваться менеджеры по рекламе, которые помогают размещать на авито информацию о товаре. Для обычных людей, которые время от времени продают товар на авито, программа может быть полезна только более удобным интерфейсом.
AviTool
Поделиться в соц. сетях
программа для автоматизации работы с Авито
Преимущества предложения
Автоматизация бизнесаПовысьте прибыльность бизнеса, эффективно оптимизируя и автоматизируя бизнес-процессы.
легком интерфейсе
Мы сохранили оптимальный баланс между богатством функционала и удобством использования.
Бесплатные обновленияи поддержка
Наши пользователи своевременно получают необходимые обновления и качественную поддержку.
Лучшее соотношение цена-качествоМы предлагаем профессиональный инструмент за невысокую стоимость без абонентской платы.
Не отвлекайтесь на рутину, уделяя больше драгоценного времени своей основной деятельности.
Ваше конкурентноепреимущество
Будьте впереди своих конкурентов, используя все возможности современных технологий.
Идеально для бизнесаПредлагаем возможности быстрой интеграции с интернет-магазинами и каталогами товаров.
Индивидуально доработаем программу, если нужно выйти за рамки базового функционала.
Эксклюзивные скидки ибонусы
Эксклюзивные скидки до 40% на прокси для наших клиентов, а также другие бонусы от партнеров.
Доступные функции
-
- Автоматическое пакетное размещение объявлений
- Пакетное редактирование, продление, поднятие, выключение, удаление объявлений
- Полностью автоматическое продление ваших объявлений
- Автоматическая регистрация аккаунтов и почтовых ящиков
- Поддержание объявлений на верхних позициях
- Регистрация аккаунтов на виртуальные симки без подтверждения номера
- Настройка переадресации с виртуальных симок и почтовых ящиков на ваши основные контакты
- Быстрая переписка с клиентами без посещения сайта
- Сбор статистики по вашим объявлениям
- Парсер для выгрузки объявлений из любых разделов сайта в Excel
- Планировщик для удобной работы по расписанию
-
- Авторазгадывание защитных картинок CAPTCHA (Rucaptcha, Anti-captcha)
- Подмена IP как через прокси, так и без использования прокси
- Быстрый импорт и экспорт объявлений из/в Excel и XML
- Интеграция с Яндекс. Маркетом и любой вашей базой данных товаров
- Рандомайзер для генерации нескольких вариантов объявлений из одного
- Автоматическая уникализация текстов объявлений и фото
- Работа со всеми доступными городами и рубриками
- «Мультигород» и «Мультиаккаунт» для быстрого размещения в разные города и аккаунты
- Утилиты для размножения объявлений и проверки прокси — в комплекте
- Встроенные инструменты для дополнительной защиты от бана и многое другое
Маркетом и любой вашей базой данных товаровВидеообзор функционала
Для кого ?
-
Тем, кто работает в «промышленных масштабах»
автопостинг, удобный интерфейс, большие возможности, гибкие настройки, планировщик, инструменты генерации, средства защиты от бана
-
Владельцам интернет-магазинов
максимально быстрый импорт товаров в программу, синхронизация с БД, работа с проектами
-
Рекламным агентам и авитологам
профессиональные инструменты для тех, кто оказывает услуги по постингу объявлений и ведет большие рекламные кампании
-
Всем пользователям
для облегчения взаимодействия с доской объявлений №1 в России
Пара слов о нас
-
Профессионализм
Мы готовы предложить широкий спектр услуг для достижения самых амбициозных целей.
-
Большой опыт
Мы более 10 лет помогаем бизнесу наших клиентов, разрабатывая цифровые продукты.
-
Гарантии
Мы оказываем всестороннюю поддержку на протяжении всего времени использования продукта.
Сделайте предзаказ
Нужна консультация? Оставьте заявку — мы свяжемся с Вами и ответим на все Ваши вопросы!
Консультация Вас ни к чему не обязывает и поможет разобраться в тонкостях работы.
Отправляя данные, Вы соглашаетесь с
политикой конфиденциальности
Вы платите один раз
Используя программу Avi-Tool, Вы не платите абонентскую плату и не переплачиваете посредникам за размещение объявлений.
Будьте на шаг впереди своих конкурентов!
А если все еще сомневаетесь, обратитесь к нам и мы расскажем, чем Вам поможет программа, при необходимости предоставив возможность ознакомления с функционалом.
Что означает AVIT? Бесплатный словарь
«В переполненном мире беспроводных устройств AV-совместной работы Teq AVIT WiPS710-NET предлагает множество решений по самым низким ценам, а также предлагает несколько моделей, которые сделают общение с корпоративными сетевыми администраторами более плавным», — сказал судья выставки. Кроме того, твиты будут содержать символы « твитнуть » и « ретвитнуть », а также могут иметь некоторые внешние ссылки, и это может быть препятствием для проведения исследования с целью получения настроений и мнений (Сагар Бхутта, Авит Доши, Учит Доши, Мира Нарвекар, 2014).Por outro lado, no teste de Vocabulario, o menino obteve um avit, uma dispancia estatisticamenteignativa (Significancia = 0,05) em relacao a sua propria media (Фигейредо, 2002).
ARINC работал в партнерстве с Aviation Information Technology (AVIT), a дочерняя компания египетской холдинговой компании для аэропортов и аэронавигации, чтобы закупить, построить и установить основные системы обработки пассажиров общего пользования (CUPPS) .AVIT ON BERTHA (гонка 5) может опередить Pony Bride в первом заезде Golden Jacket.В здании также есть интерактивные доски во всех классах, цифровой обмен сообщениями, проводной / беспроводной доступ и интегрированные системы управления AVIT. Saint Avit Loisirs, Aquitaine: отмеченный наградами парк отдыха с плавательным комплексом, который включает тропический крытый бассейн и сумасшедшую реку. (1993, 1995) demostraron que la tilapia nilotica puede ramonear eficientemente el perifiton, y otros estudios sugieren que la produccion de peces puede ser aumentada por el consumo de perifiton que coloniza sustratos (Hem y Avit 1994; Legendre et al.Пять часов спустя мы сидели в пекле поздней июньской жары возле нашего мобильного дома на небольшом, но гостеприимном участке St Avit Loisirs, недалеко от Ле-Буг в красивой долине Везере.
наш мобильный дом в небольшом, но гостеприимном месте St Avit Loisirs, недалеко от Ле-Буг, в красивой долине Везер. Затем он пошел работать в престижный лондонский ресторан Savoy Grill, прежде чем его попросил шеф-повар Саймон Скотт помочь открыть собственный ресторан , Les Saveurs De St Avit в регионе Тарн во Франции.L’Esperance avit alors tout pour elle, un stade enflamme, l’avantage au score et l’avantage numerique.Семейство белков AVIT
Abstract
Гомологи белка, первоначально выделенного из змеиного яда и выделений кожи лягушки, присутствуют у многих видов позвоночных. Они содержат 80–90 аминокислот, 10 из которых являются цистеинами с одинаковыми промежутками. Этим белкам были даны различные названия, такие как кишечный белок 1 мамбы (MIT1), Bv8 ( Bombina variegata, молекулярная масса ∼8 кДа), прокинетики и фактор роста эндотелия сосудов эндокринных желез (EG-VEGF).Их аминоконцевые последовательности идентичны, поэтому мы предлагаем использовать в качестве названия для этого семейства последовательность их первых четырех остатков, AVIT.
При сравнении последовательностей можно различить два типа белков AVIT. Эти белки, по-видимому, широко распространены в тканях млекопитающих и, как известно, связываются с рецепторами, связанными с G-белками. Было показано, что члены этого семейства стимулируют сокращение подвздошной кишки морской свинки, вызывают гипералгезию после инъекции крысам и проявляют активность в качестве специфических факторов роста.Более того, уровень информационной РНК одного из этих белков AVIT ритмично изменяется в области мозга, известной как супрахиазматическое ядро. Это показывает, что члены этого нового семейства малых белков участвуют в различных биологических процессах.
Введение
Около 20 лет назад во время анализа компонентов яда черной мамбы, Dendroaspis polylepis , Joubert & Strydom (1980) обнаружили небольшой нетоксичный белок, который они назвали белком А.Десять лет спустя Schweitz et al . (1990, 1999) протестировали этот белок на активность в различных фармакологических исследованиях и обнаружили, что он стимулирует сокращение подвздошной кишки морской свинки при наномолярных концентрациях.
Впоследствии из кожных выделений лягушек Bombina variegata и B. bombina был выделен небольшой белок, который, как было установлено путем аминокислотного секвенирования и комплементарного клонирования ДНК, был тесно связан с белком А из яда мамбы (Mollay и др. ., 1999). Более того, способность этого белка сокращать подвздошную кишку морской свинки была сравнима со способностью белка А.
Обнаружение близкородственных белков в змеином яде и выделениях кожи лягушки позволило предположить, что гомологи могут также присутствовать у млекопитающих. Действительно, в экспериментах по захвату экзонов из эмбриональных стволовых клеток мыши был выделен экзон (Nehls et al ., 1994), который потенциально кодировал часть гомолога млекопитающего (метка экспрессируемой последовательности (EST) {«type»: » entrez-nucleotide «,» attrs «: {» text «:» X81594 «,» term_id «:» 563523 «,» term_text «:» X81594 «}} X81594).Используя эту информацию о последовательности, были выделены кДНК, которые кодируют гомологичные белки человека и мыши (Wechselberger et al .
, 1999). Тем временем человеческий EST, кодирующий другого родственника, был помещен в банки данных (инвентарный номер GenBank AA883760). Позже было показано, что это фрагмент белка, названного прокинетицином 1 / EG-VEGF (фактор роста сосудистого эпителия эндокринных желез) (Li et al ., 2001; LeCouter et al ., 2001).
Эти находки ясно показывают, что существует новое семейство белков мелких позвоночных.Как описано в этой статье, несколько групп сейчас изучают эти белки и их многие биологические функции.
Номенклатура
В настоящее время во многих случаях гомологичные белки разных видов имеют разные названия, что крайне сбивает с толку новичков и неспециалистов. Действительно, недавно в комментарии Nature в общих чертах упоминалось, что «номенклатура сошла с ума» (Pearson, 2001).
В описанном здесь семействе белков это уже происходит.Конечно, первоначальное название компонента яда мамбы — белок А — неудовлетворительно, поскольку существует широко используемый одноименный бактериальный белок, связывающийся с иммуноглобулинами.
Schweitz и др. . (1990, 1999) впоследствии предложили новое название кишечного токсина мамбы 1 (MIT1). Однако, в то время как «I» относится к действию белка на кишечник морской свинки, в настоящее время ошибочно называть его токсином, поскольку белки млекопитающих с такими же свойствами естественным образом присутствуют в различных тканях, не причиняя вреда.Для белка кожи лягушки было выбрано довольно неприметное название Bv8 (из Bombina variegata с молекулярной массой ∼8 кДа). Шесть кДНК, которые кодируют варианты Bm8, белка, гомологичного Bv8 из кожных выделений лягушки Bombina maxima , недавно были депонированы в банки данных двумя группами (номера доступа в GenBank AF411090 и AF411091 и AJ440231 – AJ440234). Ситуация еще более сложная для двух млекопитающих-членов семейства белков A / MIT1 / Bv8 / Bm8.Ортологи, выделенные путем клонирования кДНК из мозга мыши и из семенников человека и мыши, назывались просто Bv8 человека / мыши (Wechselberger et al .
, 1999), но более поздние результаты показывают, что это, вероятно, вводит в заблуждение как Bv8 лягушки. более тесно связан с другим человеческим вариантом, который был помещен в банки данных (см. ниже). Две кДНК человека были выделены независимо компанией ZymoGenetics (Сиэтл, Вашингтон, США), которая подала патент и назвала полученные продукты «белками Zven» (патент WO 0136465).Чжоу и его коллеги, которые также выделили эти кДНК человека, назвали соответствующие белки «прокинетицином 1» и «прокинетицином 2» (Li et al. ., 2001), снова в основном имея в виду их действие на подвздошную кишку морской свинки. Однако название прокинетицин относится к зрелым белкам, хотя предполагает, что они являются предшественниками, такими как проинсулин и другие прогормоны. Наконец, другим путем группа из Genentech (LeCouter et al ., 2001) выделила прокинетицин 1. На основании своего анализа они назвали его EG-VEGF.
Ввиду разнообразия функций этих белков млекопитающих и, в частности, потому, что недавно были открыты новые, явно было бы желательно название семейства, основанное на структурных характеристиках.
Все эти белки имеют идентичную амино-концевую последовательность AVIT, поэтому мы хотели бы предложить общее название «белки AVIT». Следовательно, должны быть белки AVIT мамбы и лягушки, а у видов млекопитающих — в зависимости от последовательности сигнального пептида, зрелого белка и структуры гена — будет по крайней мере две подгруппы этих белков.Тип 1 будет соответствовать прокинетицину 1 / EG-VEGF (Li et al ., 2001; LeCouter et al ., 2001), а тип 2 — прокинетицину 2 и белкам Bv8 млекопитающих (см. Wechselberger et al . , 1999). Следует добавить, что в PubMed нет записей для AVIT, поэтому не будет путаницы в будущих поисках.
Структура белка
Семейство AVIT включает группу небольших белков длиной около 80–90 аминокислот. В целом идентичность между белками рыб, лягушек, змей и некоторых видов млекопитающих высока, особенно в N-концевых и центральных областях ().Большинство различий обнаруживается вблизи карбоксильного конца, который, таким образом, может быть менее важным для биологических функций.
Филогенетическое дерево, построенное из доступных последовательностей, показано на. В это сравнение мы включили последовательности белка AVIT типа 2, определенные путем клонирования кДНК из семенников быка (номер доступа в GenBank AY192557), и двух белков AVIT рыб фугу ( Takifugu rubripes ; H. Tian, личное общение). Эти данные показывают, что белки AVIT присутствуют у многих видов позвоночных, от рыб до человека.
Филогенетическое дерево, построенное с помощью программного обеспечения CLUSTAL W (версия 1.82) с использованием аминокислотных последовательностей зрелых белков. (Сокращения как в.)
Одной из примечательных характеристик этих белков является наличие десяти цистеинов с одинаковым расстоянием между ними, хотя это не является уникальным явлением для этого небольшого семейства. Сходный мотив также присутствует в ко-липазе млекопитающих (Wicker & Puigserver, 1990; Van Tilbeurgh et al ., 1992) и в C-концевых областях членов семейства внеклеточных белков Диккопфа, которые регулируют Wnt (wingless related ) / передача сигналов β-катенина (Глинка и др.
., 1998). Однако это структурное сходство, по-видимому, не находит отражения на функциональном уровне. Например, белок лягушки неактивен в анализе функции Диккопфа (К. Нирс, личное сообщение). Дальний родственник семейства AVIT с аналогичным расстоянием цистеина, но с другой N-концевой последовательностью, также был выделен из яда австралийского воронкообразного паука Hydronyche versata (Szeto et al ., 2000).
Используя методы ядерного магнитного резонанса (ЯМР), Boisbouvier et al .(1998) смогли показать, что образец дисульфидных мостиков, который ранее был определен для ко-липазы (Van Tilbeurgh et al ., 1992), также присутствует в белке, выделенном из яда черной мамбы. Кажется весьма вероятным, что это верно и для других членов семейства AVIT. Белок яда имеет компактную структуру, которая стабилизируется пятью дисульфидными мостиками с N- и C-концами на поверхности (см. ProteinDB, номер доступа 1ITM). Несколько заряженных остатков похоронены внутри молекулы, тогда как некоторые гидрофобные, такие как Trp24, подвергаются действию растворителя.
Более того, одна сторона примерно эллипсоидного белка имеет положительный суммарный заряд, тогда как противоположная сторона является гидрофобной.
Информационная РНК и последовательности генов
В настоящее время клонировано несколько кДНК, кодирующих белки AVIT рыб, амфибий и млекопитающих. Из последовательности их кДНК можно сделать вывод, что эти белки происходят из простых предшественников, которые состоят из сигнального пептида и зрелого белка. Сравнение аминокислотных последовательностей различных сигнальных пептидов снова подтверждает предложенную классификацию на два подтипа.Сигнальные пептиды пре-белков лягушки явно напоминают соответствующие последовательности млекопитающих 1-го типа по своей длине и аминокислотному сходству. И наоборот, гены предшественников Bv8 / прокинетицина 2 типа 2 из видов млекопитающих кодируют высокогомологичные, более длинные сигнальные последовательности без заметного сходства с таковыми из другой группы (). Сигнальные пептиды предшественников двух белков AVIT fugu отличаются от пептидов других белков позвоночных (H.
Tian, личное сообщение).
Сравнение сигнальных пептидов белков AVIT типа 1 и типа 2. Используемые знаки соответствуют определению в CLUSTAL W (звездочка обозначает идентичность во всех последовательностях выравнивания; двоеточия обозначают консервативные замены; точки обозначают полуконсервативные замены).
Анализ мРНК типа 2 из семенников человека, мыши и быка выявил наличие альтернативно сплайсированной формы с аналогичной вставкой из 20 или 21 аминокислоты после остатка 47 (Wechselberger et al ., 1999; Инвентарные номера GenBank AY192557 и AY192558). Вставки () богаты аргининами и лизинами и содержат несколько потенциальных сайтов расщепления для конвертаз прогормона. Это указывает на то, что могут существовать двухцепочечные формы этих белков AVIT типа 2, но в настоящее время ничего не известно о структуре и функции этих вариантов. Следует добавить, что более крупная форма, по-видимому, присутствует только в семенниках (Wechselberger et al ., 1999).
Аминокислотные последовательности основной вставки, кодируемой экзоном 3 генов AVIT типа 2 млекопитающих.(Обозначения как в.)
Анализ генов мыши и человека показал, что предшественник типа 2 кодируется четырьмя экзонами, из которых третий подлежит альтернативному сплайсингу (Jilek et al ., 2000). Этот ген расположен на хромосоме 6 мыши, рядом с геном материнского эмбрионального сообщения 1 ( Mem1 ) и на хромосоме человека 3p21.1. Ген, кодирующий предшественник типа 1, расположен на хромосоме 1p21 человека и на хромосоме 3 мыши. Границы экзон-интрон сохранены между двумя генами.Однако в геномах человека и мыши экзон, кодирующий высокоосновную вставку, которая присутствует в белках AVIT типа 2, отсутствует в генах типа 1.
Распределение в тканях
Пептиды и белки, которые присутствуют в выделениях кожи амфибий или в змеином яде, часто имеют гомологи у млекопитающих (Lazarus & Attila, 1993; Kochva, 1987). В Нозерн-блотах самые сильные сигналы были получены с РНК из семенников человека, мыши и крысы (Wechselberger et al .
, 1999; Масуда и др. ., 2002). При более подробном анализе с использованием гибридизации in situ с срезами мозга мыши и крысы мРНК Bv8 была обнаружена во многих областях, включая кору головного мозга, лимбическую область, клетки Пуркинье мозжечка, а также дорсальные и вентральные рога спинного мозга ( Melchiorri и др. ., 2001). Также недавно было показано, что мРНК, которая кодирует прокинетицин 2, ритмично экспрессируется в супрахиазматическом ядре (Cheng et al ., 2002). Из белков AVIT млекопитающих только EG-VEGF / прокинетицин 1 был выделен из коровьего молока (Masuda et al ., 2002).
Биологические функции
Стимуляция сокращения подвздошной кишки морской свинки и, в некоторой степени, толстой кишки была впервые показана для белка, полученного из яда черной мамбы (Schweitz et al ., 1990, 1999), а затем для белка кожи лягушки (Mollay et al ., 1999) и рекомбинантных прокинетиков 1 и 2 (Li et al .
, 2001). Все члены этого семейства, которые были протестированы до сих пор, связываются с рецепторами подвздошной кишки морской свинки и вызывают ее сокращение.
Дальнейшие эксперименты показали, что у крыс интрацеребровентрикулярная (i.c.v.) инъекция нескольких микрограммов Bv8 сделала животных более чувствительными к вредным раздражителям (Mollay et al ., 1999). Эта гипералгезия развивалась в течение примерно 30 минут и длилась более часа. Белок змеиного яда был в 3-5 раз более мощным, чем Bv8, в тестах на движение хвостом и давление лап, которые измеряют ноцицептивную (болевую) сенсибилизацию.
В последующих исследованиях Negri et al . (2002) показали, что этот гипералгезический эффект еще более выражен, когда белок кожи лягушки вводился подкожно (п / к), в кровеносный сосуд (в / в) или в спинной мозг (интратекально). Системная ноцицептивная сенсибилизация наблюдалась при дозах 0,06-500 пмоль кг -1 подкожно. или в / в, и 6–250 фмоль кг -1 интратекально.
Этот эффект вызван связыванием Bv8 лягушки с рецепторами ганглиев задних корешков.EG-VEGF, белок AVIT типа 1 млекопитающих, также связывается с этими рецепторами, хотя сродство по меньшей мере в десять раз меньше.
Помимо этих биологических функций, а именно стимуляции подвздошной кишки морской свинки и ноцицептивной сенсибилизации, белки AVIT также участвуют в других физиологических процессах. EG-VEGF был обнаружен при поиске секретируемых белков человека, которые стимулируют пролиферацию эндотелиальных клеток капилляров, происходящих из коры надпочечников крупного рогатого скота (LeCouter et al ., 2001). В отличие от VEGF, рекомбинантный EG-VEGF действует только на эндотелиальные клетки стероид-продуцирующих желез, таких как яичник, клетки Лейдига яичка и коры надпочечников. И VEGF, и EG-VEGF также стимулируют ангиогенез и увеличивают проницаемость (фенестрацию) в этих эндотелиальных клетках, возможно, согласованным образом. Следовательно, EG-VEGF может быть примером тканеспецифического ангиогенного фактора (LeCouter et al.
., 2002).
Более того, как уже упоминалось, прокинетицин 2, по-видимому, контролирует поведенческие циркадные ритмы (Cheng et al ., 2002). В супрахиазматическом ядре мышей уровень мРНК прокинетицина 2 примерно в 50 раз выше на пике на свету, чем в темноте. Более того, i.c.v. Было показано, что инъекция рекомбинантного прокинетицина 2 подавляет ночную двигательную активность крыс.
рецепторы AVIT и последующая передача сигналов
Сигналы от многочисленных гормонов, факторов роста, нейротрансмиттеров и т. Д. Передаются в цитоплазму клеток-мишеней через рецепторы, сопряженные с G-белком (GPCR).Связывание рекомбинантных прокинетицинов с рецепторами, которые присутствуют в подвздошной кишке морской свинки, частично ингибировалось негидролизуемым аналогом GTP GTPγS, что позволяет предположить, что рецепторы для этих белков принадлежат к семейству GPCR. Действительно, два сиротских GPCR человека (DC-H. Lin et al. ., 2002; Soga et al. ., 2002), а также их гомологи крысы и крупного рогатого скота (Masuda et al ., 2002) имеют недавно были охарактеризованы, и было обнаружено, что они связывают белки AVIT. Рецепторы прокинетицина 1 и 2 присутствуют в нескольких тканях, последняя в основном в центральной нервной системе.Рецепторы человека идентичны более чем на 85%, а соответствующие гены расположены на хромосомах 2 и 20 соответственно. Прокинетицин 2 имеет более высокое сродство к обоим рецепторам, чем прокинетицин 1.
Пути передачи сигнала, которые активируются связыванием белков AVIT с этими рецепторами, были изучены в нескольких тест-системах. Было обнаружено, что белки AVIT стимулируют путь митоген-активируемой протеинкиназы p44 / p42 (MAPK) (также известный как ERK1 / ERK2) и обмен фосфоинозитидов.Например, добавление Bv8 лягушки к гранулярным клеткам мозжечка крысы приводит к увеличению фосфорилированного p44 / p42 MAPK, а также к увеличению фосфорилированного Akt, мишени фосфатидилинозитол-3-OH киназы (PI (3) K; Melchiorri и др. ., 2001). Аналогичные результаты были получены для EG-VEGF / прокинетицина 1 в эндотелиальных клетках, происходящих из коры надпочечников (R. Lin et al ., 2002). Этот эффект на p44 / p42 MAPK также наблюдался для белка змеиного яда MIT1, который на самом деле был более активен, чем прокинетицины (Masuda et al ., 2002). Все эти эффекты блокировались PD98059, который является ингибитором p44 / p42 MAPK.
Связывание белков AVIT с их рецепторами также индуцировало временное дозозависимое повышение внутриклеточного Ca 2+ (DC-H. Lin et al. ., 2002; Masuda et al. ., 2002; Negri и др. ., 2002). Концентрации для полумаксимальных ответов находились в диапазоне 0,1–10 нМ. Было обнаружено, что на клеточном уровне белки AVIT стимулируют пролиферацию и миграцию эндотелиальных клеток, происходящих из коры надпочечников (R.Лин и др. ., 2002; Masuda et al. ., 2002), а также для защиты гранулярных клеток мозжечка от апоптоза, вызванного истощением сыворотки и ионов K + (Melchiorri et al ., 2001).
Заключительные замечания
Семейство AVIT включает два типа белков, широко распространенных у позвоночных. Функция змеиного яда и белков кожи лягушки в их выделениях неизвестна. Кажется сомнительным, что после укуса черной мамбы гипералгезия, вызванная белком A / MIT1, когда-либо ощущается до того, как жертва умирает.
Белки AVIT связываются с двумя рецепторами, которые присутствуют на различных клетках млекопитающих, что стимулирует путь MAPK p44 / p42, а также фосфорилирование Akt с помощью PI (3) K. Это может привести к делению и миграции клеток, сокращению или защите от апоптоза. У целых животных, подкожно, внутривенно или интратекальная инъекция вызывает гипералгезию, тогда как в / в. инъекция изменяет ночную двигательную активность. Вполне вероятно, что в будущем будут обнаружены и другие биологические эффекты. Например, на сегодняшний день наибольшее количество мРНК, кодирующей Bv8 / прокинетицин 2 млекопитающих, присутствует в поздних сперматоцитах семенников мыши.
Каким образом эти несколько различных функций вызываются всего двумя родственными белками? Некоторые из наблюдаемых эффектов могут быть связаны с аутокринным или паракринным действием в непосредственной близости от места секреции. Действие EG-VEGF в стероид-продуцирующих железах, секреция прокинетицина 2 гранулярными клетками мозжечка или в супрахиазматическом ядре, а также сокращение подвздошной кишки морской свинки прокинетицинами 1 и 2 могут быть примерами этого пути. И наоборот, лягушка Bv8 и EG-VEGF также действуют после периферического приложения, s.c. или внутривенно, на клетках спинного мозга, что приводит к гипералгезии от вредных раздражителей.
Что касается будущих экспериментов, будет интересно проанализировать фенотипы мышей, у которых отсутствуют гены, кодирующие один из двух белков AVIT, или один или оба их рецептора. С медицинской точки зрения возможность того, что такие исследования могут привести к характеристике нового пути восприятия боли, который действует через рецепторы в спинном мозге, может быть особенно важной.
801 (AVIT) Цена акций, новости, котировки и история
YHD — Цена с задержкой YHD.Валюта в долларах США
Об авторе