Надлежащим образом удостоверенной (заверенной) копией документа является копия, удостоверенная:
При личном обращении в НПФ «Открытие» предъявляются подлинники документов, удостоверение (заверение) копий документов осуществляется сотрудником Фонда.
Просим Вас избегать следующих часто встречающихся ошибок при заверении документов:
В случае допуска одной или нескольких из вышеперечисленных ошибок Ваши документы могут быть не приняты Фондом.
В прошлый раз мы рассказывали, как доказать легитимность электронного документа. Теперь давайте поговорим о копиях. Для чего и кому нужны бумажные копии электронных счетов-фактур, договоров, первички, и как правильно их подготовить.
ГОСТ Р 7.0.8-2013 определяет понятия, которые нам понадобятся:
Подлинник документа – первый или единственный экземпляр документа.
Копия документа – экземпляр документа, полностью воспроизводящий информацию подлинника документа.
Делайте бумажные и электронные копии с подлинников на бумаге и оригиналов в электронной форме. Представим варианты в виде схемы:
Внедряем ЭДО, сокращаем бумажный документопоток, при этом постоянно упоминаем работу с бумажными копиями. Дело в том, что далеко не все сегодня готовы работать только в электронном виде. Это касается как органов государственной власти, работы по внедрению ЭДО в которых набирают обороты, но этого еще недостаточно, так и бизнеса, который периодически напоминает о своем недоверии к электронным документам.
Рассмотрим на примерах. Истребование электронной первички налоговыми органами появилось в 2011 году. Представлять можно как электронные копии бумажных подлинников, так и изначально созданные в электронном виде документы (правильно – электронные копии электронных подлинников). Со скан-копиями проблем нет, бизнес успел проверить работу с ними на практике. С электронными оригиналами – есть нюансы. Представлять можно, но только те документы, которые были созданы в форматах ФНС, при этом служба признает один единственный формат – .XML. Для счета-фактуры этот формат обязателен, для первичных документов (товарная накладная по форме ТОРГ-12 и акт выполненных работ) рекомендуем. Получается, если вы создали товарную накладную в .XLS (excel), подписали с контрагентом ЭП, то при истребовании придется создать бумажную копию с последующей отправкой по почте (подробнее читайте в статье «Некоторые особенности представления электронных документов в налоговую»).
Таких документов может быть не один и не два. Это трудоемко. ФНС знает об этом и, мы надеемся, уже прорабатывает вопрос.Аналогичная ситуация с судами. Суды уже работают с электронными документами (подробнее в «Электронные документы в суде»), но существующей нормативной базы и практики еще недостаточно для полноценной работы. Суды принимают электронные документы в качестве письменных доказательств, но судья в ходе заседания рассмотрит документы на бумаге. Такова практика и привычки.
Таких примеров множество. И пока практика просит создания копий, делайте их правильно.
Работать с бумагой умеем, поэтому не будем на этом останавливаться. Создание электронных копий с электронных оригиналов также не вызывает вопросов. Копировать и сохранять файлы учат при первом знакомстве с ПК. Интересно, что при копировании файла мы получим копию, не отличающуюся от оригинала, копия = оригинал.
Поговорим подробнее о создании бумажной копии электронного оригинала. Подготовка такой копии состоит из 3-х шагов:
Важно! На бумажной копии поставьте отметку о подписании документа электронной подписью. Укажите место хранения оригинала. Местом хранения будет определенная информационная система, электронный архив. До сих пор законодательство не закрепило требования к форме и содержанию таких отметок (штампов), что вызывает вопросы.
О том, как выгружать из сервиса обмена бумажные копии электронных документов, чтобы они обладали юридической силой, вам расскажет видеоинструкция:
Прим. ред.
Впервые штампы упоминались в Требованиях к оформлению документов. Раздел 8.3 определяет, что документ, поступивший по электронной почте может передаваться на исполнение на бумаге со штампом «дубликат» или иным обозначением аналога электронного документа. Правильность ЭЦП (рекомендации 2003 года и изменения относительно терминологии ЭП в них еще не вносились) подтверждается соответствующей отметкой: «ЭЦП верна. Подпись оператора» или «ЭЦП подтверждена. Подпись оператора. Отметку следует проставлять в виде штампа».
Затем в письме России от 2011 года № 03-03-06/1/409 Минфин разъяснил, если истребуемый у налогоплательщика документ составлен в электронном виде не по установленным форматам (о чем мы говорили выше), представление документа производится на бумажном носителе в виде заверенной налогоплательщиком копии с отметкой о подписании документа квалифицированной электронной подписью. А какой должна быть эта отметка до сих пор никто не уточнил.
Если вы отправляли запросы в госведомства, то встречали штампы. Вариант Роскомнадзора:
Министерства связи:
Даже в органах госвласти отметки отличаются.
Также закон не определяет порядок простановки такого штампа. Он проставляется автоматически, как в сервисах операторов ЭДО СФ, либо вы создаете его собственноручно. В сложившейся ситуации рекомендуем воспользоваться примерами госорганов или операторов ЭДО СФ. Также вы вправе придумать свой вариант штампа, главное, чтобы он содержал информацию о подписании документа ЭП.
***
Подведем итог. Работа с электронными документами не избавит от бумаги на 100%. Это нормально. Госорганы или контрагенты еще работают в бумаге и для них приходится создавать бумажные копии электронных подлинников. Создание такой копии состоит из трех шагов: поиск документа, печать и заверение. Заверьте копию у нотариуса или самостоятельно.
Делайте правильные копии и только в тех случаях, когда это требуется. Ни в коем случае не создавайте дубли одного и тоже документа в бумажной и электронной формах. Не усложняйте себе работу.
Автор: Карина Кассис, аналитик Synerdocs
Нотариусы — это юристы, уполномоченные подтверждать подлинность копий документов и подписей на них, а также оценивать верность перевода документов с одного языка на другой. Они помогают удостоверять законность сделок, в том числе с недвижимостью, составлять завещания и вступать в права наследования. Нотариусы заверяют договоры дарения, оформляют согласия (например, на выезд ребенка за границу с человеком, который не является близким родственником). Помимо этого, эти специалисты понадобятся при заключении брачного договора или алиментного соглашения. Часто услугами нотариусов пользуются, когда нужно подать документы для регистрации юридического лица или оформить статус индивидуального предпринимателя.
На портале mos.ru опубликовано 10 подробных инструкций, помогающих тщательно подготовиться к встрече с нотариусом. Для удобства пользователей они собраны вместе. Чтобы ознакомиться с ними, следует зайти в раздел «Инструкции», нажать на кнопку «Документы» и найти в перечне категорию «Все о нотариате».
Как миновать суд при разрешении конфликтов и зачем нужна исполнительная надписьДля начала пользователям предлагают определиться, какого именно специалиста они ищут. Можно воспользоваться услугами любого нотариуса страны, за исключением некоторых случаев. Так, при передаче прав собственности на дом или квартиру другому человеку понадобится специалист, который работает в том городе или регионе, где находится недвижимость. А желая вступить в права наследования, следует выбрать нотариуса по последнему месту жительства наследодателя (если оно неизвестно, то по месту расположения его недвижимости). Узнать об остальных ситуациях, на которые принцип экстерриториальности (независимость от места расположения) работы нотариуса не распространяется, можно в инструкции «Как найти нотариуса».
Помимо этого, в инструкции перечислено, из чего складывается стоимость приема специалиста и какие услуги нужно оплачивать отдельно. При необходимости нотариуса можно вызвать на дом, в офис или больницу. Однако важно помнить, что тариф тогда увеличится в полтора раза. Некоторые граждане имеют право получить услуги бесплатно. Перечень доступных льгот размещен в той же инструкции.
Медиативным соглашениям посвящена другая инструкция на mos.ru. Процедура медиации — это своего рода альтернатива судебному процессу. Вместо того чтобы начинать затяжные и дорогостоящие разбирательства в суде, стороны договариваются разрешить спор, обратившись к независимому посреднику (медиатору). Медиаторами выступают юристы, социальные работники или психологи. Они помогают достигнуть взаимопонимания и прийти к выгодному решению для всех сторон при семейных, рабочих или любых других конфликтах.
Но не стоит забывать, что медиативное соглашение — это гражданско-правовая сделка. Оно не является исполнительным документом, а значит, стороны по закону не обязаны следовать принятым решениям. Чтобы придать документу исполнительную силу, требуется посетить нотариуса. Кроме того, он и сам может выступить в роли медиатора. Специалист урегулирует разногласия, а когда стороны помирятся и придут к компромиссу, заверит соглашение. О том, какие конкретно споры разрешают нотариусы и что делать, если у сторон нет возможности поговорить с медиатором вместе в одном кабинете, — в инструкции «Как подготовить и удостоверить медиативное соглашение».
Исполнительная надпись нотариуса — еще один способ избежать судебных разбирательств. Речь о ней пойдет в третьей инструкции. Такая надпись упрощает разрешение долговых конфликтов. Например, если стороны заключили договор о купле-продаже недвижимости и заверили его нотариально, но в условленный срок плательщик не перевел деньги, достаточно получить у нотариуса исполнительную надпись. Так, минуя суд, можно обратиться в службу судебных приставов и взыскать задолженность. Как получить исполнительную надпись и чем она выгодна самому должнику, можно уточнить в инструкции «Что такое исполнительная надпись нотариуса и что о ней нужно знать».
При покупке автомобиля или иного движимого имущества рекомендуется проверить, не находится ли оно в залоге. Если покупатель приобретает заложенную машину, а прежний собственник отказывается выплачивать кредит, банк может взыскать долг с нового владельца. Чтобы не попасть в затруднительное положение, нужно заранее проверить статус имущества в реестре Федеральной нотариальной палаты. Где найти этот реестр и как им пользоваться, объяснит инструкция «Как проверить, находится ли автомобиль в залоге». Здесь же пользователям дадут короткий совет о том, как доказать, что на момент покупки данных о залоге в реестре не было.
Оформление доверенностей — одна из самых востребованных услуг нотариусов. Многие занятые люди попросту не успевают справиться с круговоротом дел. Если необходимо, к примеру, заключить сделку, зарегистрировать юридическое лицо или выступить в суде, а времени нет, можно перепоручить это своему представителю. Нужно лишь сделать доверенность. В инструкции «Как оформить доверенность у нотариуса» указано, какими бывают доверенности и каков срок их действия. Кроме того, там объясняется, что делать, если необходимо отменить поручительство.
Как избежать рисков при заключении договора ренты и получить наследствоШестую инструкцию в категории «Все о нотариате» на портале mos.ru посвятили договорам ренты. Это пошаговая справка для тех, кто хочет передать право собственности на свою землю, дом или квартиру другому человеку в обмен на выплату ренты. Ее можно получать в течение оговоренного срока, размеры платежей устанавливаются сторонами, заключившими договор. Чтобы разобраться во всех бюрократических нюансах и обезопасить себя от ошибок, следует прочитать инструкцию «Как заключить договор ренты».
Без нотариуса не обойтись и при составлении завещания. Оформлять этот документ не обязательно, однако, если у человека есть особые пожелания по распределению имущества после смерти, нужно официально их заверить. В противном случае наследство разделят в соответствии с законом. В задачи нотариуса входит проверка дееспособности завещателя и законности его условий, указанных в документе. Специалисту важно изложить требования своего клиента предельно ясно и однозначно, избегая двоякого толкования. В большинстве случаев без удостоверения нотариуса завещание не будет иметь законной силы, но и тут есть некоторые исключения. Они перечислены в инструкции «Как и зачем составлять завещание». В ней же пользователи mos.ru найдут ответы на самые частые вопросы людей, которые планируют составить завещание.
Следующая инструкция будет полезна тем, кто претендует на наследство. Существует множество правил передачи имущества завещателя, а также целых восемь очередей наследников. Благодаря инструкции «Как вступить в наследство» можно определить, кто к какой очереди относится и какая доля ему положена. Здесь же указано, что вообще может входить в наследство, как поступить, если между родственниками появились разногласия, и какие документы взять с собой на прием к нотариусу.
После того как наследник получит имущество, ему потребуется зарегистрировать право собственности. Это относится к недвижимости, автомобилю или мотоциклу, выплатам, которые завещатель не успел получить при жизни (зарплаты, пособия, стипендии), накопительной части пенсии, банковским вкладам, акциям и облигациям, бизнесу или доле в нем, а также к объектам интеллектуальной собственности. В инструкции «Как оформить права на унаследованное имущество» доступны пояснения по оформлению каждого из прав собственности.
Десятая, заключительная, инструкция подскажет, как отправить своего ребенка за границу. Если мама с папой не поедут вместе с ним в путешествие, нужно обратиться к нотариусу и оформить согласие на выезд без родителей. Сопровождать несовершеннолетних в поездке могут бабушки, тети, дяди, сотрудники детского лагеря, учителя школ. С перечнем всех необходимых документов можно ознакомиться в инструкции «Как отправить ребенка за границу».
Как заранее спланировать визит к нотариусу с помощью mos.ruВ июне этого года на портале mos.ru заработал онлайн-сервис записи к нотариусу. Это совместный проект Правительства Москвы и Московской городской нотариальной палаты. Он позволяет заранее спланировать визит и не ждать приема в очереди. Достаточно отметить нужную услугу и удобное время для посещения конторы. Как отметили в Департаменте информационных технологий города Москвы, чаще всего на прием через mos. ru записываются, чтобы оформить документы для сделок с недвижимостью и разные доверенности, а также вступить в наследство, заверить копии документов и подлинность подписи. С момента запуска сервиса им воспользовались более 1300 раз.
Наверняка, каждый из нас хотя бы раз в своей жизни сталкивался с необходимостью заверения копий многостраничных документов. Такого рода требование нередко предъявляется для бумаг, которые нужно предъявить в налоговые службы, суды, банки и другие учреждения для трудоустройства, оформления имущественных сделок, открытия наследственного дела, получения пенсий и выплат. Особенно этот вопрос актуален, когда имеется острая необходимость подать один и тот же документ сразу в несколько служб.
Казалось бы, что здесь сложного? Нужно просто прийти к нотариусу и предоставить отснятые копии документов. Однако согласно опыту и практике довольно часто возникают ситуации, когда специалист отказывается совершать данную процедуру по различным на то причинам:
При отсутствии вышеперечисленных ограничений вы можете заверить у нотариуса практически любые многостраничные копии документов. Это повысит их юридическую силу и доверие к копии, исключит малейшие сомнения в ее правдивости, а также выступит надежной защитой ваших интересов в некоторых непредвиденных случаях.
Давайте представим себе такую ситуацию, что вам срочно нужно предоставить копии документов в банк для оформления кредита или к налоговикам для отчета. Хорошо, если такая копия одна, а если их более ста? Ведь несмотря на то, что компьютеры занимают важную часть в нашей жизни и с каждым днем электронный документооборот набирает все большую популярность в современном делопроизводстве, многие продолжают работать только лишь с бумажной документацией.
На сегодняшний день четких правил для заверения сшитых копий документов не существует. Однако несмотря на это, все же есть определенный алгоритм действий, которого рекомендуется придерживаться при прохождении данной процедуры:
Если вам необходимо срочно заверить сшитые копии документов, обращайтесь в нашу нотариальную контору, расположенную по адресу г. Москва, Ленинградский проспект 14 к1. У нас вы сможете заверить копии абсолютно любых документов быстро, легко и с гарантией соблюдения строгой конфиденциальности. Все, что потребуется от вас, лишь предоставить свой паспорт и сшитые копии документов, которые необходимо заверить. Стоимость удостоверения копии зависит от документа, количества страниц и согласовывается индивидуально с каждым клиентом. Для записи на прием к специалисту или получения дополнительной информации обращайтесь по телефону +7(495) 234 7966.
Сдержанный английский искусствовед Джеймс Миллер (Уильям Шимелл) приезжает в тосканскую глубинку, чтобы провести презентацию своей книги о том, что копии произведений искусства ни в чем не уступают оригиналам. Оказавшаяся на презентации хозяйка антикварной лавки (Жюльет Бинош) с этим не согласна и назначает Миллеру встречу, стремясь то ли соблазнить, то ли разубедить обаятельного писателя. Он, однако, оказывается настолько невозмутим, что за примером ей приходится ехать в совсем уж далекую деревушку, где между героями начинается постепенно выходящий из-под контроля диалог, к искусству не имеющий никакого отношения. Рассуждая о ложном и истинном, ценности простоты и зашоренности человека, герои оказываются в забегаловке, хозяйка которой принимает их за мужа и жену. Ни тот, ни другой не спешат ее поправлять, к концу фильма доводя свой негласный сговор до масштабов поистине трагических.
«Копия верна» — первая игровая картина, которую Киаростами, обладатель Золотой пальмовой ветви 1997 года («Вкус вишни»), снял за пределами родного Ирана. Против обыкновения режиссер, обычно работающий с непрофессиональными актерами, взял на главную роль мировую звезду — Бинош, сыгравшую одну из своих лучших ролей и по делу награжденную за нее в Каннах. В кадре француженку компенсирует потрясающе однообразный и оттого едва ли не выдающийся Шимелл, оперный певец, до этого никогда не игравший в кино.
Этот фильм, идущий по следам «Путешествия в Италию» Росселини, задает зрителю столько вопросов, сколько нет в задачнике по физике для восьмого класса. Размеренный диалог главных героев в какой-то момент начинает рваться, искажая реальность происходящего, и уже непонятно, играют они в мужа и жену или в самом деле давно женаты, и это игра в нечто иное? Может быть, их отношения — это та самая вынесенная в название копия оригинала, то есть отношений настоящей семейной пары? Может, речь идет о том, способны ли мужчина и женщина вообще понять друг друга? В конце концов возникает последний вопрос — почему вопросов так много? С реальностью мирит лишь то, что, кажется, перед самим Киаростами их стоит не меньше.
Из-за этой бесконечной вопросительной интонации то, что начинается как любовная история, превращается в экзистенциальную драму. В результате вместо размеренного европейского арт-хауса на экране то ли его копия, то ли пародия на «Перед закатом» Линклейтера, а вместо романтики — болезненное выяснение отношений, мифических или настоящих, уже не важно. Загадочности фильму добавляет многозначительное камео сценариста Бунюэля Жан-Клода Каррьера в роли безымянного старичка на площади. К этому моменту все запутывается так, что «Копия верна» кажется романтической комедией, которую мог бы снять Дэвид Линч.
Историю дополняют многоплановые, тщательно продуманные кадры, тосканские пейзажи и реминисценции, почему-то одинаковые у двух незнакомых (или знакомы все-таки?) людей. Добавляя еще один план проблеме коммуникации, между собой герои разговаривают на трех языках, постоянно перескакивая с одного на другой. И, самое главное, до конца непонятно, с кем они выясняют отношения — друг с другом, со зрителем или все-таки с режиссером, у которого тоже явно есть вопросы к своим героям.
Сложность эта, однако, нисколько не вымучена: она не только сознательна, но и органична и, более того, красива. Из кусочков диалогов, длинных пауз и афористических высказываний («Кто осмелится назвать некрасивым сад обнаженных деревьев?») Киаростами создал выдающийся фильм, главное достоинство которого в том, что он мирит разум и чувства и, задавая столько вопросов, не дает ни одного ответа, побуждая искать их самому. Но, множа смыслы и переплетая планы, «Копия верна» давит на центр удовольствия киномана и интеллектуала, оставляя обычного зрителя, в общем-то, без ориентиров в пространстве. Поэтому фильм способен как вызвать восхищение, так и нагнать невыносимую тоску. Но обиженным не уйдет никто: внимательному зрителю откроется какая-нибудь да истина, а заскучавший даже не поймет, что потерял.
Джеффри Тайс
Сан-Франциско, Калифорния
«Эта музыка Faux Real.» ™ Copy Correct, он же Джеффри Тайс, начал сочинять музыку в нежном возрасте 9 лет на семейном пианино и влюбился в музыку. Получив свой первый синтезатор, Джеффри обнаружил, что он может делать больше с электронными инструментами, чем с акустической музыкой, и таким образом начал свой набег на электронные звуки.Его ранние влияния в музыке включают таких исполнителей, как Erasure, Depeche Mode, Book of Love, Pet Shop Boys и другие исполнители синти-попа Новой волны, а также Acid House, New Beat и Punk Rock. В старших классах его лучший друг познакомил его с диджейской культурой и танцевальной андеграундной музыкой и показал ему основы микширования записей. Побывав на некоторых из первых рейвов, которые проводились в Центральном Техасе и его окрестностях, Джеффри стал участником раннего сообщества рейвов и ди-джеев Остина, штат Техас, и начал крутиться на домашних вечеринках, складских собраниях и в знаменитом клубе Proteus.Он один из пионеров диджейской культуры в Остине, штат Техас! Джеффри Тайс начал продюсировать оригинальные треки в начале своей карьеры ди-джея, часто продюсируя треки и играя их во время одного из своих сетов, получив широкое признание. Он очень ценит и понимает электронную музыку, и диджеинг помогает сосредоточить его продюсерские усилия. Сейчас Джеффри проживает в Сан-Франциско и окончил Pyramind, музыкальную школу, специализирующуюся на производстве музыки, теории и бизнесе. Именно там он начал экспериментировать с гибридными приложениями.Ведь в конце концов, сочетание музыки с разными звуками, текстурами и жанрами — это то, что делает ди-джей и создал свою личность — Copy Correct. Под лозунгом «Эта музыка Faux Real». Copy Correct берет классический синтипоп, электро-поп, диско, джемы начала восьмидесятых и все, что его душе угодно, и смешивает их, чтобы воплотить их в настоящем, переопределяя их для современного слушателя, меломана и танцпола. Как Copy Correct, он возвышает искусство создания гибридных приложений; он оспаривает распространенное мнение о том, что Mashups — это не настоящая музыка…что они не требуют таланта для создания, недолговечны и что они «слишком легкие». Он говорит, что, слушая эти вещи, он как мэшап-исполнитель очень обрадовался, потому что: «В конце концов, они сказали то же самое о джазе, рок-н-ролле, хэви-металле, панке, диско, хип-хопе и электронной музыке. и все мы знаем, как это было «. (По сценарию Джеймса Нила) Смотрите также: https://www.facebook.com/Copy-Correct-124650197619578/
Закон о правах семьи на образование и неприкосновенность частной жизни (FERPA) (20 U.S.C. § 1232g; 34 Свода федеральных правил, часть 99) — это федеральный закон, который защищает конфиденциальность данных об образовании учащихся. Закон распространяется на все школы, получающие средства в рамках действующей программы Министерства образования США.
FERPA дает родителям определенные права в отношении образовательных данных своих детей. Эти права переходят к учащемуся, когда он или она достигает 18-летнего возраста или посещает школу, выходящую за пределы средней школы. Студенты, которым переданы права, являются «подходящими студентами».«
Школы могут раскрывать без согласия «справочную» информацию, такую как имя, адрес, номер телефона, дата и место рождения учащегося, награды и награды, а также даты посещения. Однако школы должны сообщить родителям и подходящим ученикам справочную информацию и предоставить родителям и подходящим ученикам разумное количество времени, чтобы попросить школу не разглашать справочную информацию о них. Школы должны ежегодно уведомлять родителей и соответствующих критериям учащихся об их правах в соответствии с FERPA.Фактические способы уведомления (специальное письмо, включение в бюллетень PTA, справочник для учащихся или газетная статья) оставлены на усмотрение каждой школы.
27.02.17. Скоро мы опубликуем новую редакцию этой формы. Тем временем вы можете продолжать использовать выпуск от 27.02.17, несмотря на срок годности. Вы можете найти дату выпуска внизу страницы на форме и инструкции.
Даты указаны в формате мм / дд / гг.
У вас есть два варианта подачи заявки на форму I-90 в USCIS:
Заполнение формы I-90 онлайн
Вы должны создать учетную запись USCIS онлайн, чтобы подать форму онлайн. Наличие онлайн-счета также позволит вам:
Адвокаты и аккредитованные представители: вы также можете создать онлайн-аккаунт, который позволит вам управлять всеми приложениями ваших клиентов в одном месте.
Вы не можете подать форму I-90 онлайн, если вы подаете заявление об освобождении от уплаты сбора.
Подача формы I-90 по почте
Отправьте бумажную заявку на адреса, указанные ниже:
Почтовая служба США (USPS):
USCIS
Attn: I-90
P.O. Box 21262
Phoenix, AZ 85036-1262
Доставка FedEx, UPS и DHL:
USCIS
Attn: I-90 (Box 21262)
1820 E.Skyharbor Circle S
Suite 100
Phoenix, AZ 85034-4850
При рассмотрении заявлений и петиций, не отправленных по почте в соответствующий адрес, могут возникать задержки.
Советы по заполнению: Перейдите на нашу страницу Советы по заполнению формы, чтобы получить информацию о том, как помочь гарантировать принятие вашей формы.
Заполните все разделы формы. Мы отклоним форму, если эти поля отсутствуют:
Не забудьте подписать форму. Мы отклоним любую неподписанную форму.
Если вы подадите форму I-90 на бумаге, мы отсканируем документы в нашу систему для электронной обработки. Если у вас еще нет онлайн-аккаунта USCIS, мы создадим его для вас, как только получим ваше бумажное заявление. Вы получите уведомление о принятии учетной записи USCIS с инструкциями о том, как получить доступ к своей онлайн-учетной записи USCIS.
Примечание для поверенных и аккредитованных представителей : у вас должна быть только одна учетная запись онлайн-представителя USCIS.Когда вы получаете Уведомление о принятии учетной записи для бумажной формы, хранящейся в сейфе USCIS для вашего клиента, убедитесь, что вы вводите ту же личную информацию, которую вы указали в Форме G-28, Уведомлении о явке в качестве поверенного или аккредитованного представителя, подается вместе с исходным заявлением, петицией или запросом вашего клиента. Если информация, которую вы используете для доступа к своей учетной записи онлайн-представителя, не совпадает с информацией, которую вы предоставили в форме G-28, вы не сможете получить доступ к делу своего клиента.
Даже если вы не используете свою онлайн-учетную запись USCIS , мы продолжим обрабатывать вашу правильно заполненную и подписанную форму I-90. Вы будете получать уведомления и обновления о своей заявке по почте через Почтовую службу США. Если вам нужна помощь, обратитесь в контактный центр USCIS.
Если вы хотите получать электронное уведомление, когда мы принимаем вашу форму I-90 в сейфе USCIS, заполните форму G-1145, электронное уведомление о принятии заявки / петиции и прикрепите ее к первой странице вашего заявление.Вы можете продолжать получать обновления о статусе вашего дела, создав онлайн-аккаунт USCIS.
Если вы переезжаете, вы должны обновить свой адрес в USCIS. Вы можете сделать это через свою онлайн-учетную запись USCIS или заполнив форму AR-11 «Карта смены адреса иностранца» (онлайн или по почте).
455 долларов США.
(исключения см. В особых инструкциях ). Также может потребоваться плата за биометрические услуги в размере 85 долларов. См. Также специальные инструкции ниже для таблицы «Сборы за подачу заявки в зависимости от причины подачи заявки».
Если вы подаете форму I-90 по почте (на бумаге), вы можете оплатить сбор денежным переводом, личным чеком, кассовым чеком или кредитной картой, используя форму G-1450 «Авторизация операций по кредитной карте». Если вы платите чеком, вы должны оплатить свой чек Министерству внутренней безопасности США.
Отправляя платеж, вы соглашаетесь оплатить государственные услуги. Сборы за регистрацию и биометрические услуги являются окончательными и не подлежат возмещению, независимо от того, какие действия мы предпримем по вашему заявлению, петиции или запросу, или если вы отзовете свой запрос. Воспользуйтесь нашим калькулятором комиссионных, чтобы определить размер комиссии.
Если вы подаете форму I-90, потому что вы никогда не получали свою грин-карту, вам не нужно платить регистрационный сбор, если вы соответствуете этим критериям:
Однако вы должны предоставить:
Если вы подаете форму I-90, потому что ваша текущая грин-карта содержит неверную информацию из-за ошибки Министерства внутренней безопасности, например имя с ошибкой, вам не нужно платить регистрационный сбор. Однако вы должны отправить нам:
Сборы за подачу заявки Причина:
Причина заявки | Плата за форму | Биометрические услуги | Всего | 455 $ | 85 $ | 540 $ |
---|---|---|---|
(B) Моя предыдущая карта была выпущена, но так и не получена. | $ 0 | $ 0 | $ 0 |
(C) Моя карта была повреждена. | 455 долларов | 85 долларов | 540 долларов |
(D) На моей существующей карте неверные данные из-за ошибки DHS. | $ 0 | $ 0 | $ 0 |
(E) Мое имя или другая информация были изменены по закону. | 455 $ | 85 $ | 540 $ |
(F) Моя карта истекает в течение шести месяцев или уже истек. | 455 $ | 85 $ | 540 $ |
(G1) Мне исполнилось 14 лет, и моя существующая карта | $ 0 | $ 85 | $ 85 |
(G2) Я достиг 14-летия, и моя существующая карта | 455 $ | 85 $ | 540 $ |
(h2) Я постоянный житель, получающий статус пригородного. | 455 $ | 85 $ | 540 $ |
(h3) Я пригородный пассажир, который поселился в США.S. | 455 $ | $ 85 | 540 $ |
(I) Я автоматически преобразован в статус постоянного жителя. | 455 $ | 85 $ | 540 $ |
(J) У меня есть предыдущая версия карты, или я подаю заявку на замену карты по причинам, не указанным выше. | 455 долларов | 85 долларов | 540 долларов |
Не отправляйте этот контрольный список вместе с формой I-90.Это необязательный инструмент, который можно использовать при подготовке формы, но он не заменяет законодательные, нормативные требования и требования к формам. Мы рекомендуем вам ознакомиться с этими требованиями перед заполнением и отправкой формы. Не отправляйте оригиналы документов, если это специально не указано в инструкциях по форме или действующих нормативных актах.
Если вы подаете какие-либо документы (копии или оригиналы документов, если требуется) на иностранном языке, вы должны приложить полный английский перевод вместе с заверением переводчика, подтверждающим, что перевод является полным и точным, и что он компетентен переводить с иностранного языка на английский.
Если ваша предыдущая карта была потеряна, украдена, уничтожена или повреждена, предоставили ли вы следующее?
Если ваша предыдущая карта была выдана, но так и не получена, предоставили ли вы следующее ?
Если на вашей существующей карте указаны неверные данные из-за ошибки Министерства внутренней безопасности, предоставили ли вы следующее?
Если ваше имя или другая биографическая информация изменилась на законных основаниях, или если ваша карта содержит неверные данные и ошибка не была вызвана Министерством внутренней безопасности вы предоставили следующее?
Если срок действия вашей существующей карты уже истек или истечет в течение шести месяцев, предоставили ли вы следующее?
Если вам исполнилось 14 лет, предоставили ли вы следующее?
Если вы являетесь постоянным жителем, который принимает статус пригородного пассажира, предоставили ли вы следующее?
Если вы пригородный пассажир и фактически проживаете в Соединенных Штатах, предоставили ли вы следующее?
Если вы были автоматически преобразованы в статус законного постоянного жителя вы предоставили следующее?
Если у вас есть предыдущая версия регистрационной карты иностранца, или подаете заявку на замену вашей текущей Грин-карты по причинам, не указанным выше, предоставили ли вы следующее?
Отзыв заявки
Если вы хотите отозвать форму I-90, вы должны отправить письменный запрос по адресу:
Сервисный центр Потомака
2200 Потомак Центр Dr., Stop 2425
Arlington, VA 20598-2425
Мы не будем возвращать деньги, если вы отзовете заявку или отмените свой запрос.
Электронное уведомление: Если вы хотите получать электронное письмо и / или текстовое сообщение, когда мы принимаем вашу форму в хранилище USCIS, заполните форму G-1145 «Электронное уведомление о принятии заявки / петиции» и закрепите ее на первая страница вашего приложения.
Ссылки по теме
Информация для подачи
Файл онлайн
Посредством выпуска информации о тестировании (TIR) вы получите цифровую копию вопросов теста с несколькими вариантами ответов, используемых для определения вашей оценки, список ваших ответов, копию документа с ответами и ключ для ответов.Если вы прошли письменный тест, вы также получите копию письменного приглашения, критерии выставления оценок и баллы, присвоенные вашему эссе. Все это материалы ACT и защищены авторским правом. Вы не имеете права копировать, предоставлять другим лицам или распространять какие-либо тестовые материалы ACT.
Вы можете получить доступ к своему личному отчету МДП в MyACT, как только ваши результаты теста будут опубликованы в Интернете.При запросе дополнительных материалов (только апрель) они будут обработаны и отправлены после того, как ваш МДП будет доступен в Интернете, и их отправка по почте может занять до 8 недель.
МДП предлагается только для:
Вы можете заказать МДП в своем веб-аккаунте во время регистрации за плату в размере 30 долларов США. После проверки МДП можно заказать отдельно на срок до шести месяцев после соответствующей даты проверки за 40 долларов.
Это руководство остается в силе только в той степени, в которой оно соответствует постановлению суда по делу Ciox Health, LLC против Азара, № 18-cv-0040 (DDC 23 января 2020 г.), которое можно найти по адресу https://ecf.dcd.uscourts.gov/cgi-bin/show_public_doc?2018cv0040-51 . Более подробная информация о заказе доступна по адресу https://www.hhs.gov/hipaa/court-order-right-of-access/index.html . Любое положение в данном руководстве, отмененное решением Ciox Health, отменяется.
Большинство из нас считает, что наша медицинская и другая медицинская информация является частной и должна быть защищена, и мы хотим знать, у кого эта информация есть. Правило конфиденциальности, федеральный закон, дает вам права на вашу медицинскую информацию и устанавливает правила и ограничения в отношении того, кто может просматривать и получать вашу медицинскую информацию. Правило конфиденциальности применяется ко всем формам защищенной информации о здоровье людей, будь то электронная, письменная или устная.Правило безопасности — это федеральный закон, который требует защиты медицинской информации в электронной форме.
OCR объединилась с Управлением HHS Национального координатора по ИТ в области здравоохранения, чтобы создать Информация о вашем здоровье, ваши права! , серия из трех коротких обучающих видеороликов (на английском языке с возможностью использования субтитров на испанском языке), которые помогут вам понять ваше право в соответствии с HIPAA на доступ и получение копии вашей медицинской информации.
OCR объединилась с Управлением HHS Национального координатора по ИТ в области здравоохранения, чтобы создать этот одностраничный информационный бюллетень с иллюстрациями, который дает общее резюме ваших прав в соответствии с HIPAA:
Мы называем организации, которые должны соблюдать правила HIPAA, «защищенными организациями».
Охватываемые организации включают:
Кроме того, деловые партнеры субъектов, на которые распространяется действие страховки, должны соблюдать некоторые положения правил HIPAA.
Часто подрядчикам, субподрядчикам и другим сторонним лицам и компаниям, которые не являются сотрудниками застрахованной организации, потребуется доступ к вашей медицинской информации при предоставлении услуг застрахованной организации. Мы называем эти организации «деловыми партнерами». Примеры деловых партнеров:
Субъекты, на которые распространяется действие страховки, должны иметь контракты со своими деловыми партнерами, гарантирующие, что они будут использовать и раскрывать вашу медицинскую информацию должным образом и надлежащим образом защищать ее.Деловые партнеры также должны иметь аналогичные контракты с субподрядчиками. Деловые партнеры (включая субподрядчиков) должны соблюдать условия использования и раскрытия информации своих контрактов и Правил конфиденциальности, а также требования безопасности Правил безопасности.
Многие организации, располагающие медицинской информацией о вас, не обязаны соблюдать эти законы. .
Примеры организаций, которые не обязаны соблюдать Правила конфиденциальности и безопасности:
Медицинские страховые компании и поставщики медицинских услуг, являющиеся покрываемыми организациями, должны соблюдать ваше право на:
Вам следует ознакомиться с этими важными правами, которые помогут вам защитить вашу медицинскую информацию.
Вы можете задать своему врачу или страховщику вопросы о своих правах.
Узнайте больше о своих правах на конфиденциальность информации о здоровье.
Правило конфиденциальности устанавливает правила и ограничения на то, кто может просматривать и получать вашу медицинскую информацию.
Чтобы убедиться, что ваша медицинская информация защищена таким образом, чтобы не мешать вашему здоровью, ваша информация может быть использована и передана:
Информация о вашем здоровье не может быть использована или передана без вашего письменного разрешения, если это не разрешено законом.Например, без вашего разрешения ваш провайдер обычно не может:
Вы хотите, чтобы ваш кредитный отчет был точным, потому что он влияет на то, можете ли вы занимать деньги — и сколько вы заплатите — для того, чтобы занять деньги. Это также может повлиять на получение работы или страховки или на аренду жилья.
Информация в вашем кредитном отчете может повлиять на вашу покупательную способность и ваши шансы получить работу, арендовать или купить жилье и купить страховку. Кредитные бюро продают информацию, содержащуюся в вашем отчете, компаниям, которые используют ее для принятия решения о том, давать ли вам взаймы деньги, предоставлять вам кредит, предлагать вам страховку или сдавать вам дом. Некоторые работодатели используют кредитные отчеты при принятии решения о приеме на работу. Сила вашей кредитной истории также влияет на то, сколько вам придется заплатить, чтобы занять деньги.Вы должны быть уверены, что информация в вашем отчете является точной и полной. Узнайте, регулярно проверяя свой кредитный отчет. Вы имеете право получать бесплатные копии вашего кредитного отчета от каждого из трех основных кредитных бюро один раз в 12 месяцев. (Это Experian, Equifax и TransUnion.) Чтобы получить бесплатные кредитные отчеты, перейдите на AnnualCreditReport.com.
В условиях пандемии каждый в США может еженедельно получать бесплатный кредитный отчет от Equifax, Experian и TransUnion на AnnualCreditReport.com. Кроме того, любой человек в США может получить 6 бесплатных кредитных отчетов в год до 2026 года, посетив веб-сайт Equifax или позвонив по телефону 1-866-349-5191. Это в дополнение к одному бесплатному отчету Equifax (плюс отчеты Experian и TransUnion), которые вы можете получить на сайте AnnualCreditReport.com.
Проверка вашего кредитного отчета — также хороший способ обнаружить кражу личных данных. Это когда кто-то использует вашу личную информацию, такую как ваше имя и адрес, номера кредитной карты или банковского счета, номер социального страхования или номера счетов медицинского страхования, без вашего разрешения.Они могут покупать вещи с помощью ваших кредитных карт, получать новые кредитные карты на ваше имя, открывать счет на телефон, электричество или газ на ваше имя, украсть ваш возврат налогов или использовать вашу медицинскую страховку для получения медицинской помощи.
Затем, когда они не оплачивают счета, счет указывается в вашем кредитном отчете как неоплаченный и просроченный. Подобная неточная информация может попасть в ваш кредитный отчет и повлиять на вашу способность получить кредит, страховку или даже работу. Если вы думаете, что кто-то может использовать вашу личную информацию, перейдите на IdentityTheft.gov, чтобы сообщить об этом и получить индивидуальный план восстановления.
Если в вашей кредитной истории есть правильная, но отрицательная информация — например, если вы совершили просроченные платежи, — кредитные бюро могут поместить ее в ваш кредитный отчет. Но он не остается там навсегда. Если информация верна, кредитное бюро может сообщать наиболее негативную информацию за семь лет, а информацию о банкротстве — за 10 лет.
Как кредитное бюро, так и компания, предоставившая информацию в кредитное бюро, должны исправить неверную или неполную информацию в вашем отчете.И они должны делать это бесплатно. Чтобы исправить ошибки в вашем отчете, обратитесь в кредитное бюро и в компанию, которая сообщила неточную информацию. Скажите им, что вы хотите оспорить эту информацию в своем отчете. Вот как.
Вы должны поспорить с каждым кредитным бюро, в котором есть ошибка. Объясните в письменной форме, что вы считаете неправильным, приложите форму разрешения споров кредитного бюро (если таковая имеется), копии документов, подтверждающих ваш спор, и ведите учет всего, что вы отправляете.Если вы отправляете спор по почте, вы можете использовать адрес, указанный в вашем кредитном отчете, или адрес кредитного бюро для разрешения споров.
Equifax
Подробнее о процессе разрешения споров Equifax.
Отправьте письмо по адресу:
Equifax Information Services LLC
P.O. Box 740256
Атланта, Джорджия 30348
Experian
Подробнее о процедуре разрешения споров и форме решения Experian.
Отправьте форму с письмом по адресу:
Experian
стр.О. Box 4500
Аллен, Техас 75013
Transunion
Дополнительная информация о процессе разрешения споров Transunion по почте и через форму разрешения споров.
Отправьте форму с письмом по адресу:
ООО «ТрансЮнион» Центр потребительских споров
P.O. Box 2000
Честер, Пенсильвания 19016
Если компания продолжает сообщать спорную информацию в кредитное бюро, она должна сообщить кредитному бюро о вашем споре, а кредитное бюро должно включить уведомление о том, что вы оспариваете эту информацию как неточную или неполную.Если компания обнаружит, что оспариваемая вами информация неточна или неполна, она должна попросить кредитное бюро обновить или удалить эту информацию из вашего отчета.
Просмотрите свой кредитный отчет, чтобы убедиться, что кредитное бюро удалило неточную информацию из вашего отчета. Если компания продолжает сообщать спорную информацию, убедитесь, что кредитные бюро разместили уведомление о том, что вы оспариваете эту информацию.
Если вы заметили мошенничество, мошенничество или недобросовестные методы ведения бизнеса, сообщите об этом в FTC.Перейдите на ReportFraud.ftc.gov, веб-сайт Федеральной торговой комиссии, который упрощает отправку сообщений.
Белки синтезируются из матриц мРНК с помощью процесса, который на протяжении всей эволюции был высококонсервативным (рассмотрено в главе 3). Все мРНК считываются в направлении от 5´ к 3´, и полипептидные цепи синтезируются от амино до карбокси-конца. Каждая аминокислота определяется тремя основаниями (кодоном) в мРНК в соответствии с почти универсальным генетическим кодом.Основная механика синтеза белка одинакова во всех клетках: трансляция осуществляется на рибосомах, при этом тРНК служат адаптерами между матрицей мРНК и аминокислотами, включенными в белок. Таким образом, синтез белка включает взаимодействия между тремя типами молекул РНК (матрицами мРНК, тРНК и рРНК), а также различными белками, которые необходимы для трансляции.
Во время трансляции каждая из 20 аминокислот должна быть выровнена с соответствующими кодонами на матрице мРНК.Все клетки содержат множество тРНК , которые служат адаптерами для этого процесса. Как и следовало ожидать, учитывая их общую функцию в синтезе белков, разные тРНК имеют сходные общие структуры. Однако они также обладают уникальными идентификационными последовательностями, которые позволяют присоединить правильную аминокислоту и выровнять ее с соответствующим кодоном в мРНК.
РНК-переносчики имеют длину примерно от 70 до 80 нуклеотидов и имеют характерные структуры в виде клеверного листа, которые возникают в результате комплементарного спаривания оснований между различными участками молекулы ().Исследования рентгеновской кристаллографии также показали, что все тРНК складываются в сходные компактные L-формы, которые, вероятно, необходимы для того, чтобы тРНК вписывались в рибосомы во время процесса трансляции. Адаптерная функция тРНК включает две отдельные области молекулы. Все тРНК имеют последовательность CCA на своем 3´ конце, а аминокислоты ковалентно присоединены к рибозе концевого аденозина. Затем матрица мРНК распознается петлей антикодона, расположенной на другом конце свернутой тРНК, которая связывается с соответствующим кодоном посредством комплементарного спаривания оснований.
Структура тРНК. Структура дрожжевой фенилаланил-тРНК проиллюстрирована открытой формой «клеверного листа» (A), чтобы показать комплементарное спаривание оснований. Модифицированные основания обозначены как mG, метилгуанозин; mC, метилцитозин; DHU, дигидроуридин; (подробнее …)
Включение правильно кодируемых аминокислот в белки зависит от присоединения каждой аминокислоты к соответствующей тРНК, а также от специфичности пары оснований кодон-антикодон. Присоединение аминокислот к специфическим тРНК опосредуется группой ферментов, называемых аминоацил тРНК синтетаз, которые были открыты Полом Замечником и Махлоном Хогландом в 1957 году.Каждый из этих ферментов распознает одну аминокислоту, а также правильную тРНК (или тРНК), к которой должна быть присоединена эта аминокислота. Реакция протекает в два этапа (). Во-первых, аминокислота активируется реакцией с АТФ с образованием промежуточного соединения аминоацил-АМФ-синтетазы. Затем активированная аминокислота присоединяется к 3′-концу тРНК. Аминоацил-тРНК-синтетазы должны быть высокоселективными ферментами, которые распознают как отдельные аминокислоты, так и определенные последовательности оснований, которые идентифицируют правильные акцепторные тРНК.В некоторых случаях высокая точность распознавания аминокислот частично является результатом функции проверки, с помощью которой неправильные аминоацильные AMP гидролизуются, а не присоединяются к тРНК во время второй стадии реакции. Распознавание правильной тРНК аминоацил тРНК синтетазой также является высокоселективным; синтетаза распознает определенные нуклеотидные последовательности (в большинстве случаев включая антикодон), которые однозначно идентифицируют каждый вид тРНК.
Присоединение аминокислот к тРНК.На первой стадии реакции аминокислота присоединяется к АМФ, образуя промежуточный аминоацил АМФ. На втором этапе аминокислота переносится на 3´ конец ССА акцепторной тРНК и высвобождается АМФ. (подробнее …)
После присоединения к тРНК аминокислота выравнивается на матрице мРНК путем комплементарного спаривания оснований между кодоном мРНК и антикодоном тРНК. Спаривание оснований кодон-антикодон несколько менее жесткое, чем стандартное спаривание оснований A-U и G-C, обсуждавшееся в предыдущих главах.Значение этой необычной пары оснований в распознавании кодон-антикодон связано с избыточностью генетического кода. Из 64 возможных кодонов три являются стоп-кодонами, которые сигнализируют о прекращении трансляции; остальные 61 кодируют аминокислоты (см. таблицу 3.1). Таким образом, большинство аминокислот определяется более чем одним кодоном. Частично эта избыточность является результатом присоединения многих аминокислот к более чем одному виду тРНК. E . Например, coli содержат около 40 различных тРНК, которые служат акцепторами для 20 различных аминокислот.Кроме того, некоторые тРНК способны распознавать более одного кодона в мРНК в результате нестандартного спаривания оснований (так называемого колебания) между антикодоном тРНК и третьим положением некоторых комплементарных кодонов (). Расслабленное спаривание оснований в этом положении является частично результатом образования пар оснований G-U и частично из-за модификации гуанозина на инозин в антикодонах нескольких тРНК во время процессинга (см.). Инозин может образовывать пары оснований с C, U или A в третьем положении, поэтому его включение в антикодон позволяет одной тРНК распознавать три разных кодона в матрицах мРНК.
Нестандартная пара оснований кодон-антикодон. Спаривание оснований в положении третьего кодона ослаблено, позволяя G спариваться с U, а инозин (I) в антикодоне спариваться с U, C или A. Два примера аномального спаривания оснований, позволяющих фенилаланил (Phe) тРНК (подробнее …)
Рибосомы являются участками синтеза белка как в прокариотических, так и в эукариотических клетках. Рибосомы, сначала охарактеризованные как частицы, обнаруженные с помощью ультрацентрифугирования клеточных лизатов, обычно обозначают в соответствии с их скоростью оседания: 70S для бактериальных рибосом и 80S для несколько более крупных рибосом эукариотических клеток.И прокариотические, и эукариотические рибосомы состоят из двух отдельных субъединиц, каждая из которых содержит характерные белки и рРНК . Тот факт, что клетки обычно содержат много рибосом, отражает центральную важность синтеза белка в метаболизме клетки. E . coli , например, содержат около 20 000 рибосом, что составляет примерно 25% от сухой массы клетки, а быстрорастущие клетки млекопитающих содержат около 10 миллионов рибосом.
Общие структуры прокариотических и эукариотических рибосом схожи, хотя и отличаются в некоторых деталях ().Маленькая субъединица (обозначенная 30S) E . coli рибосом состоит из 16S рРНК и 21 белка; большая субъединица (50S) состоит из 23S и 5S рРНК и 34 белков. Каждая рибосома содержит одну копию рРНК и одну копию каждого из рибосомных белков, за одним исключением: один белок субъединицы 50S присутствует в четырех копиях. Субъединицы эукариотических рибосом больше и содержат больше белков, чем их прокариотические аналоги. Маленькая субъединица (40S) эукариотических рибосом состоит из 18S рРНК и примерно 30 белков; большая субъединица (60S) содержит 28S, 5.8S и 5S рРНК и около 45 белков.
Структура рибосомы. (A) Электронная микрофотография рибосомных субъединиц 50S E. coli. (B – C) Рентгеновские кристаллические структуры с высоким разрешением 30S (B) и 50S (C) рибосомных субъединиц. (D) Модель структуры рибосомы. (E) Компоненты прокариот и эукариот (подробнее …)
Примечательной особенностью рибосом является то, что они могут быть образованы in vitro путем самосборки их РНК и белковых компонентов.Как впервые было описано в 1968 году Масаясу Номура, очищенные рибосомные белки и рРНК могут быть смешаны вместе и при соответствующих условиях будут преобразовывать функциональную рибосому. Хотя сборка рибосом in vivo (особенно в эукариотических клетках) значительно сложнее, способность рибосом самособираться in vitro является важным экспериментальным инструментом, позволяющим анализировать роли отдельных белков и рРНК.
Подобно тРНК, рРНК образуют характерные вторичные структуры за счет комплементарного спаривания оснований ().В сочетании с рибосомными белками рРНК складываются дальше в отдельные трехмерные структуры. Первоначально считалось, что рРНК играют структурную роль, обеспечивая каркас, на котором собираются рибосомные белки. Однако с открытием каталитической активности других молекул РНК (например, РНКазы P и самосплайсинговых интронов, обсуждаемых в главе 6), возможная каталитическая роль рРНК стала широко обсуждаться. В соответствии с этой гипотезой было обнаружено, что рРНК абсолютно необходимы для сборки in vitro функциональных рибосом.С другой стороны, отсутствие многих рибосомных белков привело к снижению, но не к полной потере активности рибосом.
Структура 16S рРНК. Комплементарное спаривание оснований приводит к образованию отчетливой вторичной структуры. (Из S. Stern, T. Powers, L.-I. Changchien and HF Noller, 1989. Science 244: 783.)
Прямые доказательства каталитической активности рРНК впервые были получены в экспериментах Гарри Ноллера и его коллег. в 1992 г.Эти исследователи продемонстрировали, что большая рибосомная субъединица способна катализировать образование пептидных связей (реакция пептидилтрансферазы) даже после того, как приблизительно 95% рибосомных белков были удалены стандартными процедурами экстракции белков. Напротив, обработка РНКазой полностью устраняет образование пептидной связи, обеспечивая сильную поддержку гипотезы о том, что образование пептидной связи является реакцией, катализируемой РНК. Дальнейшие исследования подтвердили и расширили эти результаты, продемонстрировав, что реакция пептидилтрансферазы может катализироваться синтетическими фрагментами 23S рРНК при полном отсутствии какого-либо рибосомного белка.Таким образом, основная реакция синтеза белка катализируется рибосомной РНК. В настоящее время считается, что рибосомные белки не являются первичными каталитическими составляющими рибосом, а способствуют правильному укладыванию рРНК и усиливают функцию рибосом за счет правильного позиционирования тРНК.
Прямое участие рРНК в реакции пептидилтрансферазы имеет важные эволюционные последствия. Считается, что РНК были первыми самовоспроизводящимися макромолекулами (см. Главу 1).Это представление полностью подтверждается тем фактом, что рибозимы, такие как РНКаза P и самосплайсинговые интроны, могут катализировать реакции, в которых участвуют субстраты РНК. Роль рРНК в образовании пептидных связей расширяет каталитическую активность РНК за пределы саморепликации до непосредственного участия в синтезе белка. Дополнительные исследования показывают, что рибозим рРНК Tetrahymena может катализировать присоединение аминокислот к РНК, подтверждая возможность того, что исходные аминоацил-тРНК-синтетазы были РНК, а не белками.Способность молекул РНК катализировать реакции, необходимые для синтеза белка, а также для саморепликации, может служить важным звеном для понимания ранней эволюции клеток.
Хотя механизмы синтеза белка в прокариотических и эукариотических клетках схожи, существуют также различия, особенно в сигналах, которые определяют положения, в которых инициируется синтез полипептидной цепи на шаблон мРНК ().Трансляция не начинается просто с 5´ конца мРНК; он начинается с определенных сайтов инициации. 5´ -концевые части как прокариотических, так и эукариотических мРНК, следовательно, представляют собой некодирующие последовательности, обозначаемые как 5 ´ нетранслируемых областей . Эукариотические мРНК обычно кодируют только одну полипептидную цепь, но многие прокариотические мРНК кодируют несколько полипептидов, которые синтезируются независимо от различных сайтов инициации. Например, E . Оперон coli lac состоит из трех генов, транслируемых с одной и той же мРНК (см.).Информационные РНК, которые кодируют несколько полипептидов, называются полицистронными, тогда как моноцистронные мРНК кодируют одну полипептидную цепь. Наконец, как прокариотические, так и эукариотические мРНК заканчиваются некодирующими 3 ´ нетранслируемыми областями .
Прокариотические и эукариотические мРНК. Как прокариотические, так и эукариотические мРНК содержат нетранслируемые области (UTR) на своих 5´ и 3´ концах. Эукариотические мРНК также содержат 5´ 7-метилгуанозиновые (m 7 G) шапки и 3´ поли-A хвосты.Прокариотические (подробнее …)
Как в прокариотических, так и в эукариотических клетках трансляция всегда начинается с аминокислоты метионина, обычно кодируемой AUG. Альтернативные инициирующие кодоны, такие как GUG, иногда используются в бактериях, но когда они встречаются в начале полипептидной цепи, эти кодоны управляют включением метионина, а не аминокислоты, которую они обычно кодируют (GUG обычно кодирует валин). У большинства бактерий синтез белка инициируется модифицированным остатком метионина ( N -формилметионин), тогда как немодифицированные метионины инициируют синтез белка у эукариот (за исключением митохондрий и хлоропластов, чьи рибосомы напоминают рибосомы бактерий).
Сигналы, которые идентифицируют кодоны инициации, различны в прокариотических и эукариотических клетках, что согласуется с различными функциями полицистронных и моноцистронных мРНК (). Кодонам инициации в бактериальных мРНК предшествует определенная последовательность (названная последовательностью Шайна-Делгарно в честь ее первооткрывателей), которая выравнивает мРНК на рибосоме для трансляции путем спаривания оснований с комплементарной последовательностью около 3´ конца 16S рРНК. Это взаимодействие пар оснований позволяет бактериальным рибосомам инициировать трансляцию не только на 5´ конце мРНК, но также и на внутренних сайтах инициации полицистронных сообщений.Напротив, рибосомы распознают большинство мРНК эукариот путем связывания с 7-метилгуанозиновым кэпом на их 5′-конце (см.). Затем рибосомы сканируют ниже 5´ кэпа, пока не встретят инициирующий кодон AUG. Последовательности, которые окружают AUG, влияют на эффективность инициации, поэтому во многих случаях первый AUG в мРНК обходится, и трансляция инициируется в AUG дальше по течению. Однако эукариотические мРНК не имеют последовательности, эквивалентной последовательности Шайна-Делгарно прокариотических мРНК.Вместо этого трансляция эукариотических мРНК инициируется в сайте, определяемом сканированием от 5´ конца, в соответствии с их функциями как моноцистронных сообщений, которые кодируют только отдельные полипептиды.
Сигналы для инициации трансляции. Сайты инициации в прокариотических мРНК характеризуются последовательностью Шайна-Делгарно, которая предшествует инициирующему кодону AUG. Спаривание оснований между последовательностью Шайна-Делгарно и дополнительной последовательностью около 3´ (подробнее …)
Перевод обычно делится на три этапа: начало, продолжение и завершение (). И у прокариот, и у эукариот первой стадией стадии инициации является связывание специфической метионил-тРНК и мРНК инициатора с малой рибосомной субъединицей. Затем большая рибосомная субъединица присоединяется к комплексу, образуя функциональную рибосому, на которой происходит удлинение полипептидной цепи. Ряд специфических нерибосомных белков также необходим для различных стадий процесса трансляции ().
Первым этапом трансляции у бактерий является связывание трех факторов инициации (IF-1, IF-2 и IF-3) с 30S рибосомной субъединицей (). Затем мРНК и инициатор N -формилметионил тРНК присоединяются к комплексу, при этом IF-2 (который связан с GTP) специфически распознает инициаторную тРНК. Затем высвобождается IF-3, позволяя 50S рибосомной субъединице связываться с комплексом. Эта ассоциация запускает гидролиз GTP, связанного с IF-2, что приводит к высвобождению IF-1 и IF-2 (связанных с GDP).Результатом является образование инициирующего комплекса 70S (с мРНК и инициаторной тРНК, связанной с рибосомой), который готов начать образование пептидной связи на стадии элонгации трансляции.
Инициирование трансляции у бактерий. Три фактора инициации (IF-1, IF-2 и IF-3) сначала связываются с 30S субъединицей рибосомы. За этим этапом следует связывание мРНК и инициатора N -формилметионил (fMet) тРНК, которая распознается связью IF-2 (more…)
Инициирование у эукариот более сложное и требует, по крайней мере, десяти белков (каждый из которых состоит из нескольких полипептидных цепей), которые обозначены как eIF ( e ukaryotic i nitiation f Players; см.). Факторы eIF-1, eIF-1A и eIF-3 связываются с рибосомной субъединицей 40S, а eIF-2 (в комплексе с GTP) связывается с инициатором метионил тРНК (). МРНК распознается и доставляется на рибосому группой факторов eIF-4. 5´ кэп мРНК распознается eIF-4E.Другой фактор, eIF-4G, связывается как с eIF-4E, так и с белком (поли-A-связывающим белком или PABP), связанным с поли-A-хвостом на 3 ’конце мРНК. Таким образом, факторы инициации эукариот распознают как 5 ’, так и 3’ концы мРНК, что определяет стимулирующий эффект полиаденилирования на трансляцию. Факторы инициации eIF-4E и eIF-4G в сочетании с eIF-4A и eIF-4B затем переносят мРНК в рибосомную субъединицу 40S, при этом eIF-4G взаимодействует с eIF-3. Субъединица 40S рибосомы в ассоциации со связанной метионил-тРНК и eIFs затем сканирует мРНК для идентификации инициирующего кодона AUG.Когда достигается кодон AUG, eIF-5 запускает гидролиз GTP, связанного с eIF-2. Затем высвобождаются факторы инициации (включая eIF-2, связанный с GDP), и субъединица 60S связывается с субъединицей 40S с образованием инициирующего комплекса 80S эукариотических клеток.
Инициирование трансляции в эукариотических клетках. Факторы инициации eIF-3, eIF-1 и eIF-1A связываются с 40S субъединицей рибосомы. Инициатор метионил тРНК доставляется на рибосому с помощью eIF-2 (в комплексе с GTP), а мРНК с помощью eIF-4E (который связывается с (более…)
После образования комплекса инициации трансляция происходит за счет удлинения полипептидной цепи. Механизм удлинения в прокариотических и эукариотических клетках очень похож (). Рибосома имеет три сайта связывания тРНК, обозначенных сайтами P (пептидил), A (аминоацил) и E (выход). Инициатор метионил тРНК связывается по Р-сайту. Первым шагом в элонгации является связывание следующей аминоацил тРНК с сайтом А путем спаривания со вторым кодоном мРНК. Аминоацил тРНК сопровождается к рибосоме фактором элонгации (EF-Tu у прокариот, eEF-1α у эукариот), который образует комплекс с GTP.GTP гидролизуется до GDP, когда правильная аминоацил тРНК вставляется в сайт A рибосомы и высвобождается фактор элонгации, связанный с GDP. Требование гидролиза GTP до того, как EF-Tu или eEF-1α высвободится из рибосомы, является лимитирующей стадией элонгации и обеспечивает временной интервал, в течение которого неправильная аминоацил тРНК, которая будет менее прочно связываться с кодоном мРНК, может диссоциировать от рибосомы, а не использоваться для синтеза белка. Таким образом, расход высокоэнергетического GTP на этом этапе является важным вкладом в точный синтез белка; это дает время для проверки пары кодон-антикодон до образования пептидной связи.
Стадия удлинения трансляции. Рибосома имеет три сайта связывания тРНК, обозначенных P (пептидил), A (аминоацил) и E (выход). Инициирующая N -формилметионил тРНК располагается в P-сайте, оставляя пустой A-сайт. Вторая аминоацил тРНК (например, (подробнее …)
После того, как EF-Tu (или eEF-1α) покинет рибосому, может образоваться пептидная связь между инициаторной метионил тРНК в сайте P и второй аминоацильной тРНК на сайте А.Эта реакция катализируется большой рибосомной субъединицей, при этом рРНК играет решающую роль (как уже обсуждалось). В результате метионин переносится на аминоацил тРНК в сайте A рибосомы, образуя пептидил тРНК в этом положении и оставляя незаряженную тРНК инициатора на сайте P. Следующим шагом в элонгации является транслокация, которая требует другого фактора элонгации (EF-G у прокариот, eEF-2 у эукариот) и снова связана с гидролизом GTP. Во время транслокации рибосома перемещает три нуклеотида вдоль мРНК, располагая следующий кодон в пустом A-сайте.На этом этапе пептидил-тРНК перемещается с сайта A на сайт P, а незаряженная тРНК с сайта P на сайт E. Затем в рибосоме оставляют пептидил тРНК, связанную с сайтом P, и пустой сайт A. Связывание новой аминоацил тРНК с сайтом A затем вызывает высвобождение незаряженной тРНК из сайта E, оставляя рибосому готовой для вставки следующей аминокислоты в растущую полипептидную цепь.
По мере продолжения удлинения EF-Tu (или eEF-1α), который высвобождается из рибосомы, связанной с GDP, должен быть снова преобразован в свою форму GTP ().Это преобразование требует третьего фактора удлинения, EF-Ts (eEF-1βγ у эукариот), который связывается с комплексом EF-Tu / GDP и способствует обмену связанного GDP на GTP. Этот обмен приводит к регенерации EF-Tu / GTP, который теперь готов сопровождать новую аминоацил тРНК к сайту A рибосомы, начиная новый цикл элонгации. Регулирование EF-Tu путем связывания и гидролиза GTP иллюстрирует общие способы регуляции активности белков. Как будет обсуждаться в следующих главах, подобные механизмы контролируют активность широкого спектра белков, участвующих в регуляции роста и дифференцировки клеток, а также в транспорте и секреции белков.
Регенерация EF-Tu / GTP. EF-Tu в комплексе с GTP сопровождает аминоацил тРНК к рибосоме. Связанный GTP гидролизуется по мере вставки правильной тРНК, поэтому EF-Tu в комплексе с GDP высвобождается. Комплекс EF-Tu / GDP неактивен и не может связываться с другим (подробнее …)
Удлинение полипептидной цепи продолжается до тех пор, пока стоп-кодон (UAA, UAG или UGA) не будет перемещен в A-сайт рибосомы. Клетки не содержат тРНК с антикодонами, комплементарными этим сигналам терминации; вместо этого у них есть факторов высвобождения , которые распознают сигналы и прекращают синтез белка ().Прокариотические клетки содержат два фактора высвобождения, которые распознают кодоны терминации: RF-1 распознает UAA или UAG, а RF-2 распознает UAA или UGA (см.). В эукариотических клетках один фактор высвобождения (eRF-1) распознает все три кодона терминации. И прокариотические, и эукариотические клетки также содержат факторы высвобождения (RF-3 и eRF-3 соответственно), которые не распознают специфические кодоны терминации, но действуют вместе с RF-1 (или eRF-1) и RF-2. Факторы высвобождения связываются с терминирующим кодоном в сайте A и стимулируют гидролиз связи между тРНК и полипептидной цепью в сайте P, что приводит к высвобождению завершенного полипептида из рибосомы.Затем тРНК высвобождается, и рибосомные субъединицы и матрица мРНК диссоциируют.
Прекращение перевода. Кодон терминации (например, UAA) в сайте A распознается фактором высвобождения, а не тРНК. Результатом является высвобождение завершенной полипептидной цепи с последующей диссоциацией тРНК и мРНК из рибосомы. (подробнее …)
Информационные РНК могут транслироваться одновременно несколькими рибосомами как в прокариотических, так и в эукариотических клетках.Как только одна рибосома отошла от сайта инициации, другая может связываться с мРНК и начать синтез новой полипептидной цепи. Таким образом, мРНК обычно транслируются серией рибосом, расположенных с интервалом примерно от 100 до 200 нуклеотидов (). Группа рибосом, связанных с молекулой мРНК, называется полирибосомой или полисомой. Каждая рибосома в группе функционирует независимо, чтобы синтезировать отдельную полипептидную цепь.
Полисомы. Информационные РНК транслируются серией множественных рибосом (полисомой).(A) Электронная микрофотография полисома эукариот. (B) Схема обобщенного полисома. Обратите внимание, что рибосомы, расположенные ближе к 3´ концу мРНК, имеют (подробнее …)
Хотя транскрипция является основным уровнем, на котором контролируется экспрессия генов, трансляция мРНК также регулируется в обоих прокариотах. и эукариотические клетки. Одним из механизмов регуляции трансляции является связывание белков-репрессоров, которые блокируют трансляцию, со специфическими последовательностями мРНК.Наиболее понятным примером этого механизма в эукариотических клетках является регуляция синтеза ферритина, белка, который хранит железо внутри клетки. Трансляция мРНК ферритина регулируется поступлением железа: если железа в избытке, синтезируется больше ферритина (). Эта регуляция опосредуется белком, который (в отсутствие железа) связывается с последовательностью (элемент ответа на железо, или IRE) в 5´ нетранслируемой области мРНК ферритина, блокируя ее трансляцию. В присутствии железа репрессор больше не связывается с IRE, и трансляция ферритина может продолжаться.
Трансляционная регуляция ферритина. МРНК содержит элемент ответа на железо (IRE) около своей 5´ крышки. При наличии достаточного количества железа трансляция мРНК протекает нормально. Однако, если железа дефицит, белок (называемый (подробнее …)
) Интересно отметить, что регуляция трансляции мРНК ферритина железом аналогична регуляции стабильности мРНК рецептора трансферрина, которая обсуждалась в предыдущую главу (см.).А именно, стабильность мРНК рецептора трансферрина регулируется связыванием белка с IRE в его 3´ нетранслируемой области. Один и тот же белок связывается с IRE мРНК рецепторов ферритина и трансферрина. Однако последствия связывания белка с двумя IRE совершенно разные. Белок, связанный с рецептором трансферрина IRE, защищает мРНК от деградации, а не ингибирует ее трансляцию. Эти различные эффекты предположительно являются результатом разного расположения IRE в двух мРНК.Чтобы функционировать как сайт связывания репрессора, IRE должен располагаться в пределах 70 нуклеотидов 5´ кэпа мРНК ферритина, предполагая, что связывание белка с IRE блокирует трансляцию, препятствуя распознаванию кэпа и связыванию 40S рибосомной субъединицы. Вместо ингибирования трансляции связывание белка с той же последовательностью в 3´ нетранслируемой области мРНК рецептора трансферрина защищает мРНК от расщепления нуклеазой. Таким образом, связывание одного и того же регуляторного белка с разными сайтами на молекулах мРНК может иметь различные эффекты на экспрессию генов, в одном случае ингибируя трансляцию, а в другом — стабилизируя мРНК для увеличения синтеза белка.
Другой механизм регуляции трансляции в эукариотических клетках, приводящий к глобальному влиянию на общую трансляционную активность, а не на трансляцию конкретных мРНК, включает модуляцию активности факторов инициации, особенно eIF-2. Как уже обсуждалось, eIF-2 (в комплексе с GTP) связывается с инициатором метионил тРНК, доставляя ее на рибосому. Последующее высвобождение eIF-2 сопровождается гидролизом GTP, в результате чего eIF-2 остается в виде неактивного комплекса GDP. Чтобы участвовать в другом цикле инициации, комплекс eIF-2 / GTP должен быть регенерирован путем обмена связанного GDP на GTP.Этот обмен опосредуется другим фактором, eIF-2B. Таким образом, контроль активности eIF-2 посредством связывания и гидролиза GTP аналогичен контролю EF-Tu (см.). Однако регуляция eIF-2 обеспечивает критическую контрольную точку в различных эукариотических клетках. В частности, eIF-2 может фосфорилироваться регуляторными протеинкиназами. Это фосфорилирование блокирует обмен связанного GDP на GTP, тем самым подавляя инициацию трансляции. Одним из типов клеток, в которых происходит такое фосфорилирование, является ретикулоцит, который занимается синтезом гемоглобина ().Трансляция мРНК глобина контролируется доступностью гема: мРНК транслируется только в том случае, если доступен адекватный гем для образования функциональных молекул гемоглобина. В отсутствие гема активируется протеинкиназа, фосфорилирующая eIF-2, и дальнейшая трансляция ингибируется. Было обнаружено, что аналогичные механизмы контролируют синтез белка в других типах клеток, особенно в инфицированных вирусом клетках, в которых синтез вирусного белка ингибируется интерфероном.
Регуляция трансляции путем фосфорилирования eIF-2.Трансляция в ретикулоцитах (которая посвящена синтезу гемоглобина) контролируется поставкой гема, который регулирует активность eIF-2. Активная форма eIF-2 (в комплексе с GTP) (подробнее …)
Другие исследования показали, что eIF-4E, который связывается с 5´ кэпом мРНК, является регуляторным белком трансляции. Например, гормон инсулин стимулирует синтез белка в адипоцитах и мышечных клетках. Этот эффект инсулина опосредуется, по крайней мере частично, фосфорилированием белков, связанных с eIF-4E, что приводит к стимуляции активности eIF-4E и увеличению скорости инициации трансляции.
Регулирование трансляции особенно важно на раннем этапе развития. Как обсуждалось в главе 6, различные мРНК хранятся в ооцитах в нетранслируемой форме; трансляция этих сохраненных мРНК активируется при оплодотворении или более поздних стадиях развития. Одним из механизмов такой регуляции трансляции является контролируемое полиаденилирование мРНК ооцитов. Многие нетранслируемые мРНК хранятся в ооцитах с короткими поли-А-хвостами (примерно 20 нуклеотидов). Эти сохраненные мРНК впоследствии привлекаются для трансляции на соответствующей стадии развития путем удлинения их поли-А-хвостов до нескольких сотен нуклеотидов.Кроме того, трансляция некоторых мРНК во время развития, по-видимому, регулируется репрессорными белками, которые связываются со специфическими последовательностями в своих 3´ нетранслируемых областях. Эти регуляторные белки могут также направлять мРНК в определенные области яиц или эмбрионов, обеспечивая локальный синтез кодируемых белков во время эмбрионального развития.
Ключевой эксперимент: каталитическая роль рибосомной РНК.
Об авторе